Contribution à l'obtention d'hybrides somatiques et à leur caractérisation chez Lycopersicon

• Auteur / Autrice : Régine Fritz-Coupat
• Direction : Yvette Dattée
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques
• Date : Soutenance en 1989
• Etablissement(s) : Paris 11

Mots clés

Mots clés contrôlés

Triazines

Électrofusion

Hybridation végétale

Protoplastes végétaux

Lycopersicon

Mots clés libres

Hybridation somatique

Résumé

In the first part of this thesis is described the characterization of plants issued from somatic hybridization between tomato (Lycopersicon esculentum> and Solanum pennellii protoplasts. The cytological, biochimical and molecular analysis performed, showed that these plants are diploid (2n = 24) as their parents, and expressed some nuclearly encoded traits from their parents. Chloroplastic and mitochondrial DNA restriction patterns indicate that their cytoplasm are identical to the tomato cytoplasm. The second part concerned the import of chloroplasts from Solanum nigrum (confering a resistance to the triazine), into the L. EscuLentum and the L. Peruvianum cytoplasms by somatic hybridization. A method for obtaining protoplasts able to divide, and subsequent regeneration of plants is described. Plants regenerated from s. Nigrum and L. Peruvianum protoplasts only were obtained. Somatic hybridization between L. EscuLentum and s. Nigrum, and L. Peruvianum and S. Nigrum were performed by proto­ piast electrofusion. Irradiation of S. Nigrum (350 or 1000 Gy) favoured asymetric hybridizations. All the plants regenerated from a fusion between L. EscuLentum and S. Nigrum have the S. Nigrum phenotype, and display triazine resistance. The plants regenerated from a fusion between L. Peruvianum and irradiated S. Nigrum have the L. Peruvianum phenotype. Triazine resistance tests will allow us to screen the plants having S. Nigrum chloroplasts.

La première partie de notre travail concerne la caractérisation de plantes obtenues lors d’expériences d’hybridation somatique entre la tomate cultivée, (L. Esculentum) et S. Pennellii. Les quatre types d’analyses réalisées, cytologique génétique, biochimique et moléculaire indiquent que les plantes régénérées sont diploïdes, (2n=24), comme les parents et possèdent des caractères nucléaires des deux partenaires. L’étude des profils de restriction des ADN chloroplastique et mitochondrial de ces plantes, permet de conclure que leur cytoplasme est identique à celui de la tomate cultivée. La seconde partie de notre travail est consacrée au transfert des chloroplastes de S. Natrum, conférant la résistance aux thiazines, dans le cytoplasme de. L. Esculente, puis de L. Peruvianum, par la technique d’hybridation somatique. Un protocole d’obtention et de division des protoplastes, suivi de la régénération de plantes est mis au point. Des régénérations ne peuvent être obtenues qu’à partir de protoplastes de S. Nigrum et L. Peruvianum. Les expériences d’hybridation somatique entre L. Esculentum et S. Nigrum, puis entre L. Peruvianum et S. Nigrum sont réalisées par électrofusion de protoplastes des deux partenaires. L’irradiation de S. Nigrum par rayon Ƭ à des doses de 350 ou 1000 Gy, permet de favoriser les hybridations asymétriques. Les plantes régénérées lors d’expériences d’hybridation entre. L. Esculemtum et S. Nigrum, ont toutes le phénotype de S. Nigrum et sont résistantes aux triazines. En ce qui concerne L. Peruvianum et S. Nigrum irradié, les plantes régénérées possèdent le phénotype de L. Péruvianum, des tests de résitances aux triazines permettront de sélectionner d’éventuels transferts de chloroplastes.