Étude des mécanismes du rejet vasculaire aigu à médiation humorale et application d'immunointervention innovante dans un modèle pré clinique chez le babouin et en xénotransplantation

Study of the mechanisms of acute humoral vascular rejection and innovative immunointervention application in a preclinical model in baboons and in xenotransplantation

• Auteur / Autrice : Xavier Tillou
• Direction : Gilles Blancho
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Médecine. Sciences de la vie et de la santé. Immunologie
• Date : Soutenance en 2012
• Etablissement(s) : Nantes
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Biologie-Santé Nantes-Angers
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Nantes Université. Pôle Santé. UFR Médecine et Techniques Médicales (Nantes)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Inhibiteurs du protéasome

Immunologie de transplantation

Hétérogreffes

Résumé

En transplantation rénale, la recherche de nouvelles thérapeutiques du rejet aigu humoral s'inscrit dans un contexte d'augmentation du nombre de patients immunisés. La première partie de ce travail a consisté à développer un modèle préclinique du rejet aigu à médiation humorale en allotransplantation, afin de tester de nouvelles stratégies thérapeutiques. Les animaux immunisés par deux injections consécutives de PBMC du donneur avant transplantation, développent des anticorps cytotoxiques IgG, dirigés spécifiquement contre les molécules du CMH de classe I du donneur. Une simple monothérapie avec un inhibiteur du Complément (rhC1INH) dans ce modèle de transplantation à « cross-match » positif, a permis de prévenir efficacement le rejet aigu à médiation humorale pendant le temps du traitement et jusqu'à l'apparition d'un rejet cellulaire. Le travail suivant a donc été d'explorer un modèle de xénotransplantation de reins Gal-KO multitransgéniques pour des protéines humaines de régulation du complément. Les traitements associant inhibition du complément et blocage de la lignée B par un inhibiteur du protéasome, précédés de plasmaphérèse n'ont pas permis d'obtenir des survies plus longues que dans la littérature. Nous avons montré l'existence d'une pré-immunisation avec la présence d'anticorps nonGal à un titre faible, mais hautement cytotoxique. Malgré l'efficacité du bortézomib et du rhC1-INH, les xénogreffes de porc Gal-KO. HCD55. HCD59. HCD39. HHTTg ont été rejetées par une réponse immune combinant une infiltration du greffon par des monocytes / macrophages et les lymphocytes T, un dépôt de xénoanticorps et l'activation de la voie alterne du complément. L'étude de ces modèles a permis de mieux connaître les mécanismes immunologiques impliqués dans le rejet aigu à médiation humorale que ce soit en xénotransplantation mais aussi en allotransplantation.

In kidney transplantation, the growing number of immunized patients is a motor for the development of new therapeutic management in acute humoral rejection. Part of this work was to develop a preclinical model of humoral acute rejection in allotransplantation to test new therapeutic strategies. Baboons were immunized by two consecutive injections of donor PBMC before transplantation, and developed cytotoxic IgG antibodies specifically directed against the donor’s MHC class I. A simple monotherapy with an inhibitor of complement (rhC1INH) in this model (positive "cross-match" transplantation) effectively prevented acute humoral rejection during the time of treatment and until cellular rejection occured. The following work was therefore to explore a model of Gal-KO multitransgenic for human complement regulatory proteins, in kidney xenotransplantation. Treatments involving inhibition of complement and blocking the B cells line by a proteasome inhibitor, preceded by plasmapheresis, failed to obtain longer survival rates than in the literature. Nevertheless we showed the existence of a pre-immunization with nonGal antibodies at small but highly cytotoxic levels. Despite the efficacy of bortezomib and rhC1-INH, pig xenografts Gal-KO. HCD55. HCD59. HCD39. HHTTg were rejected by an immune response combining graft infiltration by monocytes / macrophages and T lymphocytes, xenoantibodies deposits and activation of the alternative complement pathway. The study of these models gives us a better understanding of the immunological mechanisms involved in acute humoral rejection whether in xenotransplantation or in allotransplantation.