CDP-DAG synthase and regulation of phospholipid synthesis in Plasmodium falciparum
Auteur / Autrice : | Shilpa Nagaraju Shastri |
Direction : | Henri Vial, Clemens H.M. Kocken |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Biologie cellulaire |
Date : | Soutenance en 2009 |
Etablissement(s) : | Montpellier 2 |
Ecole(s) doctorale(s) : | École doctorale Sciences Chimiques et Biologiques pour la Santé (Montpellier ; 1992-....) |
Mots clés
Mots clés contrôlés
Mots clés libres
Résumé
Les phospholipides (PL) sont indissociables de la croissance des Plasmodies, parasites responsables du paludisme, que ce soit pour leur biogenèse membranaire, la signalisation ou le trafic cellulaire. Leur synthèse peut être d'intérêt pharmacologique que si elle est particulière en regards de l'hôte. Ces études ont eu pour but de caractériser la CTP- acide phosphatidique cytidyltransferase (CDS) qui fournit le CDP-DAG, indispensable précurseur des phospholipides anioniques. L'enzyme CDS de P. Falciparum (PfCDS) possèdent une unique et longue extension N-terminale (N-PfCDS) de fonction inconnue qui est clivée. Par des études biochimiques, génétiques et de biologie cellulaire, nous montrons le caractère indispensable de cette extension N-terminale unique. Le clivage protéolytique de la CDS Pro-form est conservé dans les Plasmodies, mais le site de clivage précis n'a pu être déterminé. L'extension N-terminale est une protéine associée aux membranes et possédant une affinité pour les phospholipides anioniques. Elle est exportée à l'extérieur du parasite à la vacuole parasitophore. Cela renforce l'intérêt pour ce domaine N-terminale formée par protéolyse et qui parait essentiel. Nous avons découvert MAL7P1. 31, un autre gène possédant un domaine cytidylyltransferase transferase CTP-1 qui n'est partagée que par la CDS et les Dolichol kinase. La protéine correspondante Pf53 est retrouvée associée à la membrane de vésicules localisées dans le cytosol parasite, mais ne possède aucune des activités prédites comme le montre des études de complémentation entreprises chez des bactéries et la levure. Des études menées dans P. Berghei montrent que le gène n'est pas essential pour la croissance du parasite dans le sang. Un troisième travail s'est intéressé à la régulation des nombreuses voies de biosynthèses des PL chez Plasmodium. Une stratégie globale d'analyse in silico sur P. Falciparum révèle la présence d'un élément réactif à la choline et l'inositol (ICRE) qui pourrait être une séquence d'activation « Upstream » comme cela a été démontré chez la levure. Ceci ouvre de nouvelles perspectives pour des études de régulations des voies de biosynthèse des PL chez les Plasmodies, domaine encore totalement inexploré