Rôle des sérine/thréonine protéine-kinases dans la virulence de Staphylococcus aureus

Role of serine/threonine protein-kinases in the virulence of Staphylococcus aureus

• Auteur / Autrice : Jean-Philippe Didier
• Direction : Bertrand Duclos
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie
• Date : Soutenance le 22/10/2009
• Etablissement(s) : Lyon 1
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Interdisciplinaire Sciences-Santé (Villeurbanne ; 1995-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Molecular Microbiology and Structural Biochemistry (Lyon ; 1999-....)
• Jury : Président / Présidente : Alain-Jean Cozzone
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Jérôme Étienne
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Anne Galinier, Michel Véron, Isabelle Virlogeux-Payant

Mots clés

Mots clés contrôlés

Dictyostelium discoideum

Virulence (microbiologie)

Staphylocoque doré

Sérine / thréonine kinases

Mots clés libres

Sérine/thréonine protéine-kinases

Staphylococcus aureus

Stk

SarA

Virulence

Dictyostelium discoideum

Serine/threonine protein-kinases

Staphylococcus aureus

Stk

SarA

Virulence

Dictyostelium discoideum

Résumé

Ce travail porte sur l’étude des mécanismes de phosphorylation des protéines par les sérine/thréonine kinases chez Staphylococcus aureus. Nous avons, tout d’abord, mis en évidence et caractérisé une seconde Ser/Thr-kinase, nommée Stk2. Cette kinase présente peu d’homologies avec les autres Ser/Thr-kinases bactériennes décrites à ce jour, en particulier avec la première Ser/Thr-kinase mise en évidence précédemment chez S. aureus, Stk1. Nous avons ensuite caractérisé dix sites d’autophosphorylation de Stk2 et nous avons montré que trois sites sont nécessaires à son activité. Enfin, nous avons montré que le régulateur global de virulence, SarA, est phosphorylé à la fois par Stk1 et Stk2. La phosphorylation de SarA influence sa capacité de liaison à l’ADN. Cette étude contribue à mieux appréhender, au niveau moléculaire, le rôle des Ser/Thr-kinases dans le métabolisme des bactéries et, plus particulièrement, dans la régulation de leur virulence

We report that protein phosphorylation on serine and threonine is required for controlling staphylococcal virulence. We identified and characterized a second serine/threonine kinase, Stk2, in S. aureus. Biochemical analyses revealed that this enzyme displays autokinase activity on both threonine and serine residues. Stk2 is atypical in the sense that it exhibits a weak similarity with the first Ser/Thr-kinase previously detected, Stk1, and its undergoes a different mechanism of activation compared to the other bacterial Ser/Thr-kinases described so far. We also showed that SarA, a major transcription factor that regulates more than a hundred virulence genes, is phosphorylated by both Stk1 and Stk2. Phosphorylation of SarA leads to strong effects on its ability to bind DNA. The study of Stk1 and Stk2, at the molecular level, provides a better understanding of the role of these staphylococcal Ser/Thr-kinases in bacterial metabolism and, in particular, in the regulation of virulence