Etude de la localisation de l’herpèsvirus humain de type 6 (HHV-6) dans les tissus hodgkiniens : recherche de l’expression de l’oncogène viral DR7 et de ses conséquences pour la cellule

Localization of human herpesvirus type 6 (HHV-6) in Hodgkin’s tissues : DR7 viral oncogene expression and its consequences for the cell

• Auteur / Autrice : Aurélie Lacroix
• Direction : Sylvie Ranger-Rogez
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie - Sciences - Santé
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Limoges
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université de Limoges. Faculté des sciences et techniques

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cellules de Reed-Sternberg

Virus d'Epstein-Barr

Hodgkin, Maladie de

Herpèsvirus humain 6

Mots clés libres

Oncoprotéine DR7B

Id2 inhibiteur de E2A

Résumé

L’herpèsvirus humain de type 6 (HHV-6) au caractère lymphotropique présente deux variants A et B, ce dernier étant associé au lymphome de Hodgkin (LH). Toutefois, cette association est controversée dans la littérature car elle est présente dans de rares cas et absente dans la cellule caractéristique du LH : la cellule de Reed-Sternberg (RS). Lors du premier objectif de notre travail de thèse, la PCR quantitative a démontre�� l��existence et a quantifié le virus HHV-6 au sein d’une cohorte de patients atteints de LH; ceci de façon concomitante ou non au virus d’Epstein et Barr (EBV) connu pour être associé à cette pathologie. Par la suite, l’anticorps anti-DR7B de l’HHV-6 produit par nos soins a permis de connaître la localisation cellulaire du virus HHV-6 et ainsi de détecter sa présence en grande quantité dans la cellule RS pour 73,7% des patients atteints de LH seulement positifs pour l’HHV-6. En outre, un double marquage chez les patients de la cohorte positifs pour les deux herpèsvirus a démontré la colocalisation, notamment au niveau de la cellule RS, des oncoprotéines DR7B du virus HHV-6 et LMP1 du virus EBV signifiant une probable interaction virale. Enfin, un système de transfection stable permettant de moduler l’expression de DR7B au sein de cellules B matures proches des cellules RS a été réalisé. Il a permis d’observer l’induction, en présence de DR7B, de la surexpression tant au niveau transcriptionnel que traductionnel, comme au sein des cellules RS du LH, de Id2 qui est un inhibiteur de E2A, facteur de transcription impliqué dans la reprogrammation phénotypique des cellules RS.

There are two variants, A and B, of human lymphotropic herpesvirus type 6 (HHV-6). The B variant is associated with Hodgkin’s lymphoma (HL). However this association is contreversial in the literature because it only exists in rare cases and not in Reed-Sternberg cells (RS), the characteristic cells of HL. In the first part of our study quantitative PCR demonstrated the existence of HHV-6 alone or concommitantly with Epstein-Barr virus, known to be associated with HL, in a cohort of HL patients. We then used an anti-HHV-6 DR7B antibody produced in our laboratory to determine the cellular localization of HHV-6 and to detect its presence in large quantities in RS cells from 73. 7% of HL patients positive only for HHV-6. Furthermore, double labeling studies in patients from the cohort positive for both herpesviruses demonstrated the colocalization, notably in RS cells, of DR7B from HHV-6 and LMP1 from EBV oncoproteins, indicating a probable viral interaction. Finally, a stable transfection system was realised to adjust DR7B expression in mature B cells which are close to RS cells. In the presence of DR7B, a transcriptionnal and translational expression of Id2, an inhibitor of E2A wich is a transcription factor implicated in phenotypical reprogramming of RS cells, similar to RS cells in HL, was observed.