Apport des échanges Hydrogène/Deutérium (H/D) en spectrométrie de masse pour la détermination structurale du neuropeptide FF humain & caractérisation d’inhibiteurs réversibles de l’acétylcholinestérase par spectrométrie de masse

par Romain Dolé

Thèse de doctorat en Chimie. Spectrochimie

Sous la direction de Catherine Lange.

Soutenue en 2007

à Rouen .


  • Résumé

    La première partie de ce travail a consisté à développer une méthode associant les échanges H/D à la spectrométrie de masse (ECSI-MS) pour étudier la structure des peptides. Cette technique a d’abord été optimisée sur des peptides modèles, puis appliquée à l’étude structurale du neuropeptide FF humain (NPFF) impliqué dans la modulation de la douleur. Nos résultats expérimentaux ont été corrélés à la structure modélisée. La seconde partie de ce manuscrit a été consacrée à la caractérisation d’inhibiteurs réversibles de l’acétylcholinestérase (AchE). Son inhibition permet d’accroître la réponse cholinergique chez les personnes atteintes de la maldie d’Alzheimer. Nous nous sommes placés dans les conditions michaeliennes afin de suivre la cinétique enzymatique par ESI-MS. Cette approche expérimentale nous a permis d’identifier les modes d’inhibition et d’obtenir les constantes d’inhibition associées.

  • Titre traduit

    Contribution of hydrogen/Deuterium (H/D) exchange in mass spectrometry to structural determination of human neuropeptide FF & Characterization of reversible inhibitors of acetylcholinesterase by mass spectrometry.


  • Résumé

    In the first part of this study, we have developped a method that combines H/D exchange with mass spectrometry (ESI-MS) to elucidate peptide structures. This method was optimized on model peptides and applied to structural study of human neuropeptide FF (NPFF) involved in pain modulation. Experimental data were in agreement with structural predictions. The second part of this study concerns the characterization of reversible inhibitors of acetylcholinesterase (AchE). Its inhibition increases cholinergic response in Alzheimer’s disease. We have investigated enzymatic kinetic in michaelis conditions by ESI-MS. Our experimental approach has been successfully applied to identify inhibition modes and to determine inhibition constants.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (270 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 217 réf

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  • Bibliothèque : Université de Rouen. Service commun de la documentation. Section sciences site Madrillet.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : 07/ROUE/S061(a)
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