Alix, un lien entre la voie endolysosomale et la mort cellulaire

Alix, a link between the endolysosomal system and cell death

• Auteur / Autrice : Anne-Laure Mahul
• Direction : Sandrine Fraboulet, Rémy Sadoul
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Neurobiologie
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Neurones moteurs

Mort cellulaire

Endosomes

Mots clés libres

Alix

Alg-2

Escrts

Tnfr1

Résumé

Alix est une protéine adaptatrice impliquée dans la régu lation du système endolysosomal grâce il son interaction avec des protéines comme CIN85 et les endophilines, protéines participant à l'endocytose de récepteurs ou les protéines des complexes ESCRT nécessaires il la maturation des compartiments endosomaux, Alix pourrait également contrôler la mort neuronale en se fixant il Ja protéine ALG-2. Le but de mon projet de thèse a été de tester si A lix intervient dans la mort des motoneurones au cours du développement in vivo et de définir !es mécanismes moléculaires sous-jacents. J'ai montré que l'expression d'une protéine tronquée, correspondant à la moitié C-terminale d'Alix (A!ix-CT) protège les motoneurones cervicaux de la mort cellulaire programmé précoce (PCD). Cette protection dépend de la liaison d'Alix CT à ALG-2 et à ESCRT-I mettant en évidence l'implication du complexe Alix/ALG-2 avec les protéines ESCRT dans la mort natureIle des motoneurones : Alix ferait le lien entre la voie endolysosomale et la machinerie de mort cellulaire. J'ai montré que la délétion du site de liaison à CIN85, connue pour participer à l'endocytose du récepteur au TNF[alfa], le TNFRI, dans Alix-CT, inhibe sa capacité protectrice sur la PCD. La suite de mon travail démontre qu'Alix fonctionne en aval de la signalisation du TNFR1 à la fois in vivo et in vitro. Alix/ALG-2 interagit avec le TNFR1 au niveau des endosomes et pourrait permettre la forrmation d'une plareforme d'activation de: la caspase-8 qui serait recrutée au niveau des «endosome de mort » contenant le TN FR 1.

Alix is an adaptor protein involved in the regulation of the endolysosomal system through binding to endophilins and CIN85, proteins involved in the receptor endocytosis and to ESCRl proteins invoJved in the endosomal function. Several observations suggest a role for Alix in controlling neuronal cell death through its interaction with ALG-2 protein. I wanted to test whether Alix may influence cell death of motoneurons (MTN) in vivo. The C-terminal part of Alix (Alix-CT) prevents carly programmed cell death (PCD) in cervical MTN at day 4,5 of chick embryo development. This effect depends 00 the Alix-Cr interaction with ALG-2 and F:SCR'r-I protein. Our resuJts suggest thar rhe interaction of the ALG-2! A!ix complex with r:SCRr proteins is necessary for the naturaIJy occurring death of M'T'N. Therefore, Alix!ALG-2 complex could make a link betwcen endosomcs and a signalling or an execution step of neuronal death. 1 have shown that the delerion of CIN85 binding site, a protein iovolved in the TNFR 1 endoeytosis, in Alix-Cr tota!!y aboJished the capacity of the latter to block rhe carly death of MTN in vivo. 1 have !iJund evidenee thar Alix funetions downstream of the dl'ath-inducing rl'cepror TNFR J, both in early MT'N dcath in (}J'O and ill vitro in cultured eells induced to die by TNFR! overcxpression, 1 have shown tha! A!ix! ALG-2 comp!ex interacts with 'rNFRJ localized on endo. ;omes. Alix, togeth. ::r with ALG-2 seems to help recruiting and activating elements of the death machinery such as caspase 8 onto "death-inducing endosomes" containing activated TNFR 1.