La ribonucléotide réductase anaérobie d'Escherichia coli, une protéine à zinc : importance du site métallique pour la structure et l'activation de l'enzyme

The anaerobic ribonucleotide reductase from escherichia coli, a zinc protein : importance of the metal-binding site for the enzyme structure and activation

• Auteur / Autrice : Florence Luttringer
• Direction : Etienne Mulliez, Marc Fontecave
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie structurale
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Zinc

Mots clés libres

Catalyse enzymatique

Protéolyse

Résumé

Les ribonucleotides reductases (rnrs) sont des enzymes ubiquitaires essentielles pour la synthese d'adn. La croissance en anaerobiose d'escherichia coli depend d'une rnr de classe iii. L'enzyme activee contient un radical sensible a l'oxygene situe sur le residu g681 dont la formation implique l'intervention concertee d'une proteine activatrice fer-soufre, de s-adenosylmethionine, de dithiothreitol (dtt), et d'un systeme reducteur. La structure cristallographique de la rnr du bacteriophage t4 a revele la presence d'un site metallique zn(cys)4 dans la partie c-terminale de la reductase. Dans ce travail nous avons defini de nouvelles conditions de purification conduisant a des enzymes tres actives, montre que le zinc controle la structuration de la boucle cter contenant le site radicalaire et que, contrairement a ce qui etait admis depuis plus de 15 ans, le dtt n'intervient pas dans la formation du radical gly· mais plutot dans les transferts radicalaires entre gly· et le substrat.