Régulation de la GTPase RHOB par phosphorylation

Regulation of the small GTPase RhoB by phosphorylation

• Auteur / Autrice : Vanessa Tillement
• Direction : Anne Pradines
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Physiologie animale cellulaire et intégrée. Biochimie et biologie cellulaire
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Régulation cellulaire

Calmoduline

Protéines kinases

Phosphorylation

GTPases

GTPases Rho

Mots clés libres

GTPase RHO

Rhob

Régulation

Phosphorylation

Caséine kinase 1

Calmoduline kinase II

Résumé

RhoB appartient à la famille Rho (RhoA, RhoB et RhoC) des GTPases de faible poids moléculaire, régulées par un cycle de liaison au GDP et GTP. Nous avons mis en évidence que RhoB est régulée également par phosphorylation. Contrairement à RhoA, qui est phosphorylée par la PKA, RhoB est, elle spécifiquement phosphorylée par la Caséine kinase 1 (CK1) et la Calmoduline kinase II in vitro et in vivo. Des études en spectrométrie de masse nous ont permis de montrer que CK1 phosphoryle RhoB dans son extrémité C-terminale sur la sérine 185. L'utilisation d'inhibiteurs de CK1 a permis de montrer que la phosphorylation de RhoB CK1-dépendante inhibe sa liaison à un des ses effecteurs, donc probablement son activité. Des résultats préliminaires suggèrent fortement que la phosphorylation de RhoB par CK1 est impliquée dans la régulation du trafic du récepteur à l'EGF suite à son internalisation par l'EGF.

RhoB belongs to the Rho family (RhoA, RhoB and RhoC) of the low molecular weight GTPases, regulated by cycling between GDP and GTP bound state. We have shown that RhoB is also regulated by phosphorylation. On contrast to RhoA, which is phosphorylated by PKA, RhoB is specifically phosphorylated by Casein kinase 1 (CK1) and Calmodulin kinase II in vitro and in vivo. Mass spectrometry analysis has shown that CK1 phosphorylates RhoB on its C-terminal sequence on serine 185. With CK1 inhibitors we have shown that CK1-mediated phosphorylation of RhoB inhibits its binding to one of its effector, thus inhibiting its activity. Finally, preliminary results strongly suggest that RhoB phosphorylation by CK1 is implicated in the regulation of the intracellular trafficking of internalized EGF receptor.