Développement de méthodologies séparatives couplées à la spectrométrie de masse pour le dosage des nucléotides et nucléosides antiviraux du VIH

Development of hyphinated technics coupled with mass spectrometry for the quantification of anti-HIV nucleoside and nucleotides

• Auteur / Autrice : Vincent Bezy
• Direction : Luigi A. Agrofoglio
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Conception, synthèse, analyse et structure des composés d'intérêt biologique
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Orléans

Mots clés

Mots clés contrôlés

Nucléotides

VIH (virus)

Analogues

Nucléosides

Chromatographie en phase liquide

Spectroscopie de masse

Électrophorèse capillaire

Résumé

Cette étude de développement de procédures de dosage des métabolites plasmatiques et intracellulaires des Inhibiteurs Nucléosidiques de la Transcriptase Inverse (INTIs), s’inscrit dans le cadre du suivi thérapeutique. L’efficacité de ces drogues étant patient « dépendante », l’ajustement thérapeutique des traitements administrés se doit d’être optimisé. Nous avons mis en place deux procédures de dosage, par électrophorèse capillaire et chromatographie liquide, couplées avec la spectrométrie de masse. Les méthodologies de dosage simultané des métabolites intracellulaires dans des extraits cellulaires PBM ont été validées en suivant les critères SFSTP – pharmacopée européenne - et de la FDA (Federal Drug Administration). Les limites de quantification sont de l’ordre de quelque dizaine de ng/mL par EC-ESI-SM/SM et quelques centaines de pg/mL par CPL-ESI-SM/SM. Pour terminer, dans le cadre de l’adhérance, une procédure d’analyse des métabolites plasmatiques de sept INTIs a été mise en place et pré-validée par CPL – UV. Les Limites de Quantification (LOQs) obtenues sont de l’ordre de quelques dizaines de ng/mL.