Mise en évidence de cellules-souches neurales dans le complexe vagal dorsal de rongeur adulte et recherche de leurs facteurs de contrôle

par Céline Charrier

Thèse de doctorat en Neurosciences

Sous la direction de Emmanuel Moyse.

Soutenue en 2005

à Aix-Marseille 3 .

mots clés

• Cellules souches
• Neurones
• Développement neurologique
• Système nerveux autonome
• Neurotrophines
• Leptine
• Névroglie
• Facteurs de croissance

Résumé

Le complexe vagal dorsal (CVD) est un centre neurovégétatif cérébral présentant plasticité et neurogenèse chez le rat adulte. In vivo, j'ai démontré l'existence de cellules prolifératives dans le CVD par immunohistochimie de Ki-67 et par western-blot des cyclines D. In vitro, sur cultures primaires de CVD microdisséqué, j'ai obtenu des neurosphères auto-renouvelables contenant neurones et cellules gliales. Donc le CVD de rat adulte contient des cellules-souches neurales. J'ai recherché des facteurs de contrôle des cellules-souches du CVD par deux approches. In vivo, la stimulation proliférative post-lésionnelle du CVD a été correlée, par RT-PCR et par biopuce à ADN, avec l'induction de deux mitogènes : les facteurs de croissance EGF et BDNF. In vitro, la prolifération des cellules–souches neurales a été inhibée par l'hormone anorexigène leptine. Ces résultats de neurobiologie cellulaire apportent une vision nouvelle des processus intégratifs en physiologie neurovégétative.

Titre traduit

Demonstration of neural stem cells in the dorsal vagal complex of adult rodent and quest for their extracellular regulators

Résumé

The dorsal vagal complex (DVC) is a neurovegetative cerebral center displaying plasticity and neurogenesis in adult rat. In vivo, I have demonstrated occurrence of proliferative cells within DVC by Ki-67 immunohistochemistry and by D-cyclin western-blot. In vitro, in primary cultures from microdissected DVC, I have generated neurospheres showing self-renewal and containing neuronal and glial cells. Therefore adult rat DVC does contain neural stem cells. I have looked for extracellular regulators of DVC stem cells through two approaches. In vivo, lesion-induced proliferative stimulation in DVC was correlated, by RT-PCR and by DNA microarray, with transcriptional induction of two mitogens: the growth factors EGF and BDNF. In vitro, neural stem cell proliferation was inhibited by the anorexigenic hormone leptin. These cellular neurobiology data bring about novel vistas about integrative processes in autonomic neurosciences