Développement d'un modèle membranaire biomimétique supporté pour l'approche des mécanismes mitochondriaux impliqués dans le stress oxydant

par Ophélie Fliniaux

Thèse de doctorat en Stratégies d'exploitation des fonctions biologiques

Sous la direction de Christian Bourdillon.

Soutenue en 2004

à Compiègne .


  • Résumé

    L'étude du stress oxydant est envisagée via le fonctionnement de la chaîne de transfert d'électrons mitochondriale reconstituée dans un modèle membranaire. Les protéoliposomes ont été préparés par enrichissement lipidique de fragments de membrane mitochondriale interne. Un support original pour la membrane a été développé : une électrode d'alumine, dont les pores sont assez larges pour permettre l'entrée des vésicules. Les assemblages moléculaires ont été optimisés pour décoller la membrane du support et limiter les interactions non spécifiques entre les protéines et la surface. L'influence du rapport lipides/protéines des protéoliposomes sur la formation de la membrane a été étudiée. L'évaluation de l'effet fusogène de différents traitements a été réalisée. Ces différentes études ont permis la reconstitution de la membrane par fusion provoquée des protéoliposomes. Des essais d'électrocatalyse enzymatique ont été réalisés pour accéder à la fonctionnalité des enzymes intégrées.

  • Titre traduit

    Artificial membrane development to study mitochondrial involvement in oxidative stress


  • Résumé

    Our aim is to study oxidative stress via the functional mitochondrial electron transfer chain that is incorporated into a membrane mode!. Proteoliposomes were obtained from lipid enriched native inner mitochondrial membrane. An original support bas been developed to reconstitute the artificial membrane: an aluminium oxide microporous electrode in which the pores were big enough to allow the accumulation of vesicles inside the electrode. We have used the proteoliposomes to reconstitute the membrane by triggered fusion. The functionalization of the support had to be optimized to allow the membrane tethering and to avoid the non-specifie binding phenomena due to protuberant membrane proteins. We also had to investigate the supported membrane formation with various lipid/protein ratios for proteoliposomes as weIl as evaluate the triggered fusion efficiency of different treatments. Preliminary enzymatic electrocatalysis experiments have been performed to study proteins functionality.

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Informations

  • Détails : 125 p.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 119 réf.

Où se trouve cette thèse\u00a0?

  • Bibliothèque : Université de Technologie de Compiègne. Service Commun de la Documentation.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 2004 FLI 1475
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