La trappe ionique et l'ionisation electrospray : un nouveau potentiel pour la caracterisation des biomolecules. caracterisation de biomolecules presentes en faible quantite par spectrometrie de masse et spectrometrie de masse multiple (ms n)

par NATHALIE CARTE

Thèse de doctorat en Chimie

Sous la direction de Alain Van Dorsselaer.

Soutenue en 2001

à Strasbourg 1 .

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  • Résumé

    La recente innovation instrumentale de la spectrometrie de masse a permis d'etendre les possibilites de la technique d'analyse en ameliorant les performances, et en accedant grace a la spectrometrie de masse tandem (ms 2) a des informations structurales fines caracteristiques des molecules analysees. L'objectif de ce travail a ete d'evaluer les possibilites d'une nouvelle generation de spectrometre de masse capable d'effectuer des analyses ms n ; l'esquire-lc constitue d'un analyseur trappe ionique (it) couple a une source electrospray (es). La premiere partie du manuscrit presente la caracterisation des biomolecules par ms et ms n et precise les informations structurales obtenues (chapitre i). Apres avoir optimise l'esquire-lc (chapitre ii), nous avons adapte des strategies d'analyses nanoes-ms n a chaque etude abordee dans le chapitre iii. Nous avons ainsi mis en evidence, des modifications proteiques (analyse proteomique et analyse de nouveaux variants d'hemoglobine), caracterise une modification engendree par un inhibiteur sur une enzyme (l'adohcy hydrolase), sequence de novo un peptide n-bloque issu de la drosophile et accede aux structures complexes des glycosylations proteiques. La deuxieme partie du manuscrit presente des etudes de caracterisation d'edifices non-covalents biologiques qui necessitent des precautions d'analyse ms minutieuses (chapitre i). Notre objectif etait de determiner prealablement les conditions instrumentales adequates de l'esquire-lc, propices au maintien des interactions faibles en phase gazeuse et a l'integrite de l'edifice non-covalent (chapitre ii). Tres prisee par les biologistes, la ms supramoleculaire nous a permis d'evaluer la selectivite du cis platine pour l'adn (chapitre iii). Ce travail souligne l'interet de la ms n par es-it pour l'elucidation structurale des biomolecules. Il est cependant primordial de maitriser les differents parametres instrumentaux qui facilitent l'obtention des informations mais surtout leur qualite.


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Informations

  • Détails : 307 p.
  • Annexes : 300 ref.

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