Expression et adressage du transporteur de glucose Glut-1 dans les cellules épithéliales thyroïdiennes

• Auteur / Autrice : Nezha Samih
• Direction : Guy Fayet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Médecine. Endocrinologie cellulaire et moléculaire
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cellules épithéliales thyroïdiennes

Transporteur de glucose de type 1

Adressage des protéines

Mots clés libres

Protéine transportant glucose

Thyroïde

Transport intracellulaire

Glycosylation

Résumé

Le transporteur de glucose de type 1 (Glut-1) est l'isoforme majoritairement exprimée dans la cellule thyroïdienne. Sa fonction principale est le transport du glucose à travers la membrane plasmique par diffusion facilitée. Nous nous sommes intéressés au mécanisme d'action de l'insuline, de la TSH et du dibutyryl AMP cyclique sur le transport du glucose et l'exocytose de Glut-1 vers la surface de la cellule thyroïdienne FRTL-5. Nous avons montré tout d'abord que ces différents facteurs augmentaient la consommation et le transport du glucose vers l'intérieur de la cellule ainsi que l'exocytose de Glut-1 vers la surface cellulaire. Nous avons d'autre part montré que l'exocytose de Glut-1, stimulée par ces différents facteurs, est dépendante de l'activité de la PB-kinase. En effet, l'inhibition de la PB-kinase affecte aussi bien la translocation que l'activité du transport du glucose, stimulée par l'insuline, la TSH ou le dibutyryl AMP cyclique. Par ailleurs, nous avons montré que la PKA qui relaie les effets de l' AMP cyclique n'exerce aucun effet sur le transport du glucose ni sur l'exocytose de Glut-1, dans notre modèle expérimental. Ainsi, la PB-kinase via le cAMP semble jouer un rôle clé dans le transport du glucose et l'exocytose de Glut-1, dans la cellule FRTL-5. Au cours de ce travail, nous avons observé une différence d'expression-de Glut-1 en fonction des situations·pathologiques. Dans des cellules thyroïdiennes humaines provenant d'un cancer anaplasique, une altération du transport du glucose ainsi qu'une altération structurale dans la partie glycannique de Glut-1 ont été observées par rapport aux cellules thyroïdiennes humaines normales·. Ce constat nous a conduit dans un premier temps à nous intéresser au rôle biologique de la partie glycannique de Glut-1 dans. La cellule thyroïdienne de rat FRTL-5 et dans les cellules thyroïdiennes humaines provenant d'un cancer anaplasique. Dans ce but, nous avons essayé de comprendre la relation entre le transport du glucose, l'expression de Glut-1 à la surface cellulaire et les étapes de maturation de sa partie glycannique. Les résultats que nous avons obtenus montrent que la partie glycannique semble nécessaire au bon fonctionnement du transporteur mais pas à son exocytose vers la surface cellulaire. En effet, la déglycosylation complète de Glut-1 est associée à la perte de son activité biologique et bien que les deux formes glycosylée et non glycosylée de Glut-1 arrivent à la surface cellulaire, seule la forme glycosylée semble fonctionnelle. D'autre part, nous avons montré que le transporteur portant des chaînes oligosaccharidiques N-liées de type oligomannosidique, au lieu des chaînes complexes, reste fonctionnel. La maturation des motifs glycanniques ne semble pas nécessaire au transport de Glut-1, ni à son activité biologique.