Etude fonctionnelle des mecanismes controlant l'expression de genes impliques dans la mise en place de l'appareil de traduction dans les cellules de plantes en division

• Auteur / Autrice : Alexandra Manevski
• Direction : Bernard Lescure
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Sciences médicales
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

L'expression des genes codant les composants de la machinerie de traduction est regulee selon les conditions de croissance et les stades de developpement. La caracterisation du promoteur des genes codant le facteur d'elongation de la traduction eef1a d'arabidopsis thaliana a permis d'identifier des elements regulateurs responsables d'une surexpression de ces genes dans les cellules en division active. Ces elements tef et telo se retrouvent dans le promoteur de plusieurs genes codant des elements de l'appareil de traduction. Les resultats obtenus permettent de conclure quant a la fonction de ces elements et de proposer un mode de regulation. A) la boite tef conduit la formation de deux complexes multiproteiques in vitro, c1 et c2, en presence d'extraits proteiques totaux prepares a partir d'une culture de cellules d'arabidopsis thaliana. Le site de fixation du complexe c1 correspond au site de fixation du complexe nfb, regulateur potentiel de la transcription de l'arn ribosomique. L'isolement, apres purification sur colonne d'affinite des proteines appartenant aux deux complexes c1 et/ou c2 a ete realisee en vue d'un microsequencage. B) l'element telo, utilise pour realiser le criblage d'une banque d'expression dans e. Coli avec une sonde constituee de multimeres de cet element a permis le clonage d'un adnc codant une proteine notee atpur en raison de sa similarite avec la proteine animale tres conservee pur. C) l'element tef et la boite telo agissent en cooperativite pour activer l'expression d'un gene rapporteur gus dans les cellules de meristemes racinaires. D) le role de l'element telo dans le promoteur d'autres genes surexprimes dans les cellules en division a ete evalue. Il a ete montre que d'autres elements cis-activateurs agissent en synergie avec l'element telo. Un parallele est etabli entre l'element telo et la boite rpg de la levure saccharomyces cerevisiae. L'eventuelle implication de l'element telo dans la transition g 1/s est discutee.