Identification et caracterisation de canaux potassiques chez la vigne vers une amelioration de la balance acido-basique de la vendange

• Auteur / Autrice : REJANE PRATELLI
• Direction : Hervé Sentenac
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Sciences médicales
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : École nationale supérieure agronomique (Montpellier ; 1960-2006)

Résumé

Un exces de k + dans les baies de raisin se traduit par une alteration de l'equilibre acido-basique du mout, gravement prejudiciable aux qualites physico-chimiques et organoleptiques du vin. Nous nous sommes interesses aux determinants moleculaires du transport de k + dans la vigne, en recherchant des canaux potassiques de type shaker, par criblage de banques d'adn. Deux canaux ont ete identifies et caracterises (analyse du profil d'expression in planta et des proprietes fonctionnelles dans l'ovocyte de xenope). Le premier canal, sor, est tres semblable aux canaux de la famille skor d'arabidopsis. C'est un canal d'efflux, exprime dans les parties aeriennes vegetatives et dans les baies. Son expression, analysee par rt-pcr quantitative, semble peu variable au cours du developpement des fruits. Sor pourrait etre implique dans la charge en k + de la baie. Le second canal, sirk, est un canal d'influx, comme son orthologue kat2 chez arabidopsis. A l'aide d'une construction placant le gene rapporteur gus sous le controle du promoteur sirk, nous avons constate que sirk est exprime dans les cellules de garde des feuilles, des tiges et des petioles, aussi bien en systeme heterologue (chez arabidopsis) qu'en systeme homologue, apres transformation genetique de cals embryogenes de vigne. Il semble egalement exprime dans les cellules de garde des baies avant la veraison. Dans une derniere etape, nous avons engage une approche de genetique inverse en transformant la vigne avec un canal sor dote d'un comportement de type mutant dominant negatif, et obtenu des plantes presentant apparemment un phenotype.