Les exopolysaccharides chez burkholderia cepacia : caracterisation structurale de fractions exopolysaccharidiques produites par une souche mucoide isolee de mucoviscidose

• Auteur / Autrice : Stéphane Cérantola
• Direction : Henri Montrozier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

L'emergence de b. Cepacia en tant que pathogene majeur de la mucoviscidose, en raison notamment de son association unique avec une degradation acceleree de l'etat general des malades apres acquisition de la bacterie (parfois appelee syndrome cepacia), a conduit a un necessaire inventaire des differents facteurs bacteriens qui peuvent participer a la mise en place, au developpement et au maintien des infections par ce micro-organisme opportuniste. Les exopolysaccharides (eps) produits par b. Cepacia ont ete repertories, a l'image de ceux synthetises par d'autres bacteries, comme facteurs de virulence potentiels de cette bacterie. L'essentiel de ce travail a ainsi ete axe sur l'etude structurale des eps produits par une souche mucoide de b. Cepacia (bc1) isolee de mucoviscidose. La purification des eps, par chromatographie d'echange d'ions ou par precipitation selective par des sels d'ammoniums quaternaires, a conduit a la mise en evidence de deux polymeres principaux a caractere acide, ps-i et ps-ii. Ces polymeres, dont les syntheses semblent plus ou moins sous la dependance des conditions de culture, peuvent etre produits conjointement ou non par la bacterie. Les structures completes de ces deux eps ont ete etablies a partir de differentes degradations chimiques (depolymerisations partielles, degradation de smith, -elimination, degradation par le lithium) et d'analyses des produits natifs ou de degradations par chromatographie gazeuse (gc) couplee ou non a la spectrometrie de masse (gc/ms) et par resonance magnetique nucleaire (rmn). Il a ainsi ete montre que ps-i presentait une structure relativement simple basee sur la repetition d'un motif disaccharidique compose par les residus 4,6-o-(1-carboxyethylidene)-galactose et glucose. La structure de l'unite de repetition de ps-ii est quant a elle plus complexe. Il s'agit d'un motif heptasaccharidique comprenant le squelette trisaccharidique glucose->acide glucuronique->mannose et trois ramifications glycosylant les deux unites mannose et acide glucuronique, deux de ces ramifications etant constituees d'une seule unite galactose et la troisieme du motif disaccharidique galactose->rhamnose. Ce polysaccharide, qui se caracterise par la presence d'un residu d'acide glucuronique trisubstitue par des residus osidiques, est en outre non stoechiometriquement substitue par des residus acetyles. L'extension de cette etude a d'autres souches de b. Cepacia de differentes origines a montre que la plupart des souches auraient la capacite a produire des eps dont la structure la plus representative de l'espece serait celle de l'eps ps-ii.