Caracterisation structurale et fonctionnelle d'une proteine de la famille des kinesines, xklp3

Molecular, structural and functionnal characterization of a xenopus kinesin-like protein, xklp3

• Auteur / Autrice : NATHALIE LE BOT
• Direction : ERIC KARSENTI
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Le transport intracellulaire gouverne le tri des proteines et des membranes synthetisees dans le reticulum endoplasmique (r. E) vers differentes destinations. Les elements du cytosquelette, notamment les microtubules, jouent un role important dans ce processus. Au cours de ces dernieres annees, de nombreuses proteines moteurs de la famille des kinesines, permettant le deplacement de cargos varies le long des microtubules ont ete identifiees. Dans de nombreux cas, la nature des cargos et la fonction de ces moteurs restent encore a definir. Lors de mon travail de these, j'ai etudie l'organisation moleculaire, la localisation et la fonction d'un moteur de la famille des kinesines, chez le xenope, xklp3. J'ai utilise le domaine moteur precedemment identifie par isabelle vernos afin de cloner la proteine entiere. Une analyse de sequence et des donnees de biochimie montrent que xklp3 appartient a la sous-famille de la kinesine ii ou heterotrimerique. Les moteurs de ce groupe font partie d'un complexe compose de deux kinesines de la meme famille et d'une unite non-motrice. Dans des cellules de xenope de type fibroblastique, xklp3 est associee a des membranes localisees entre le r. E et l'appareil de golgi comme le demontrent des etudes de localisation par des methodes d'immunofluorescence, de microscopie electronique et biochimiques. Un mutant dominant negatif de xklp3 exprime dans ces cellules bloque le transport des proteines entre le r. E et le golgi. Je propose que xklp3 est importante pour le transport et la localisation des proteines nouvellement synthetisees dans l'appareil de golgi. De plus, dans les cellules de la peau de xenope, xklp3 est associee a des organites pigmentaires, les melanosomes, et participe a leur mouvement centrifuge. Ces resultats indiquent qu'un moteur moleculaire peut avoir plusieurs fonctions, dans un meme organisme, selon le type de cellules ; ceci souleve des questions interessantes quant a la regulation de sa localisation et de son activite.