Etude de l'expression du proto-oncogene c-myb et de ses proprietes biochimiques au cours de la proliferation et de la differenciation monocytaire des cellules des lignees humaines hl-60 et hl-60 variantes

• Auteur / Autrice : Christophe Gaillard
• Direction : Bernard V. Perbal
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Le proto-oncogene c-myb, qui joue un role clef dans l'hematopoiese, exerce ses proprietes transactivatrices de transcription en interagissant avec des sites de reconnaissance mre presents dans le promoteur de genes cibles. Nous disposons d'un systeme cellulaire compose des lignees tumorales myelomonocytaires humaines hl-60 variantes qui presentent une activation de la capacite des cellules a proliferer en comparaison des cellules hl-60 parentales et differents degres de resistance a l'induction de la differenciation monocytaire par le tpa. Nous avons tire parti de ces alterations pour etudier les mecanismes par lesquels le gene c-myb controle le developpement cellulaire. L'etude de l'expression de c-myb dans les cellules hl-60 variantes a revele une difference de la regulation de son expression par rapport aux cellules hl-60. Ces resultats nous ont conduit a analyser l'activite de liaison a l'adn de la proteine c-myb exprimee dans les cellules hl-60 variantes. A l'aide d'experiences de retard de migration sur gel, nous avons identifie un defaut de liaisons de c-myb avec les sites mre des genes cibles pr264 et mim-1. L'activite de liaison a l'adn est recouvree lorsque les cellules variantes sont transfectees par une proteine myb recombinante. Nous avons propose que l'alteration de liaison a l'adn puisse resulter d'une inhibition par des facteurs presents en quantite limitante dans ces cellules. De plus, nos resultats indiquent que le defaut d'interaction de c-myb avec l'adn n'interfere pas avec la proliferation des cellules variantes. L'ensemble de ces resultats montre que la proliferation et la differenciation des cellules hl-60 variantes ne dependent pas de l'activite de liaison de myb a l'adn. Ces travaux ouvrent des perspectives pour l'identification de nouveaux partenaires proteiques de c-myb dont l'association en synergie pourrait permettre a celle-ci d'exercer une activite transactivatrice independante de son interaction avec les mre des genes cibles.