Analyse cellulaire et moleculaire du developpement du systeme hematopoietique et vasculaire au cours de l'embryogenese humaine

• Auteur / Autrice : FERNANDO CORTES CABANILLAS
• Direction : Bruno Péault
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Nous avons analyse la mise en place des systemes hematopoietique et vasculaire de l'embryon humain. Nous avons evalue dans quelle mesure la proteine d'adherence hca (hematopoietic cell antigen), exprimee par les cellules souches hematopoietiques ftales et adultes, pouvait medier l'interaction de ces dernieres avec leur microenvironnement. Nous montrons : i) que hca est exprime par des sous-populations de cellules stromales dans tous les sites d'hematopoiese primaire au cours du developpement ; ii) que l'antigene de surface cd6, un ligand de hca dans le thymus, est present a la surface de progeniteurs sanguins cd34 + ; iii) que la molecule hca purifiee a partir du stroma medullaire fixe de facon specifique differents types de cellules stromales et hematopoietiques exprimant hca et/ou cd6. Ces resultats suggerent le role de hca dans l'adherence des cellules hematopoietiques au stroma environnant. Notre seconde voie d'etude concerne l'emergence des lignees hematopoietique et endotheliale au cours de l'embryogenese. En comparant l'expression du recepteur du vascular endothelial growth factor kdr et de l'antigene cd34 commun aux cellules sanguines et endotheliales, nous identifions des cellules mesodermiques non differenciees kdr + cd34 qui, au cours de leur differenciation endotheliale acquierent graduellement le marqueur cd34. D'autre part, un nombre croissant de cellules kdr + cd34 est observe dans la splanchnopleure jusqu'au stade qui precede l'apparition des premieres cellules sanguines intraaortiques dont elles pourraient etre a l'origine. La caracterisation moleculaire de cette population par hybridation in situ montre l'expression des recepteurs de facteurs de croissance c-kit et kdr et des facteurs de transcription c-myb, gata-2, gata-3 et tal-1/scl. Nous avons de plus isole, par criblage differentiel d'une banque d'adnc 3 construite a partir des cellules cd34 + intraaortiques, une sequence correspondant a une serine/threonine kinase dont le patron d'expression dans les cellules hematopoietiques et endotheliales, des les stades precoces de l'embryogenese, suggere le role dans l'emergence de ces deux lignees.