Identification des régions d'interaction de la cyclophiline B avec les glycosaminoglycannes, un récepteur membranaire et la calcineurine : importance de ces régions dans l'adhésion des lymphocytes T à la fibronectine

• Auteur / Autrice : Mathieu Carpentier
• Direction : Geneviève Spik
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Lille 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Fibronectines

Calcineurine

Cellules endothéliales

Lymphocytes T

Glycosaminoglycanes

Résumé

La cyclophiline B (CyPB) est une protéine présente dans le plasma qui possède une poche de fixation à la cyclosporine (CsA) et un site enzymatique catalysant l'isomérisation cis/trans de la liaison prolyl. In vitro, le complexe CyPB/CsA inhibe la calcineurine (CN), une phosphatase clef de l'activation lymphocytaire. La CyPB se fixe à la surface des lymphocytes T par deux régions qui reconnaissent l'une, une structure octasaccharidique d'un glycosaminoglycanne sulfaté (GAG) et l'autre une protéine membranaire de 75 kDa. Ces deux types de structure sont aussi présentes à la surface des cellules endothéliales et assurent la fixation et la transcytose de la CypB à travers un modèle de la barrière hémato-encéphalique. Grâce à l'utilisation de variants de la CyPB obtenus par mutagenèse dirigée, nous avons montré que les tripeptides 3KKK5 et 14YFD16 de la région N-terminale basique de la CyPB interagissent avec les GAGs alors que l'un des résidus conservés de la poche de fixation de la CsA (W128) ainsi que les résidus G77, K132 et D155 participent à la fixation au récepteur protéique. Ces trois résidus sont aussi impliqués dans le site de reconnaissance de la CN. Lors de l'adhésion des lymphocytes T à la matrice extracellulaire et en particulier, à la fibronectine, la CypB augmente l'adhésion par un mécanisme qui implique l'activation des intégrines Béta1. A l'aide des différents mutants de la CyPB nous avons montré que les résidus du site catalytique, du site de fixation au récepteur et de la région d'interaction avec les gags interviennent dans l'augmentation d'adhésion des lymphocytes T à la fibronectine. La CyPB apparaît donc comme une petite molécule multifonctionnelle portant diverses régions d'interaction avec des composés intra- et extra-cellulaires.