Caracterisation et identification de nouveaux substrats de tyrosine kinases dans la signalisation il-2

Characterization and identification of new tyrosine kinase substrates in il-2 signaling

• Auteur / Autrice : Franck Gesbert
• Direction : Jacques Bertoglio
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

L'il-2 est responsable du controle de la proliferation et de la differenciation des lymphocytes t, nk et b. La liaison de l'il-2 sur son recepteur de haute affinite induit une phosphorylation precoce, sur residus tyrosine, des chaines et du recepteur et de multiples substrats proteiques intracellulaires. Ces evenements de phosphorylation sont necessaires a la transduction du signal conduisant a l'activation de differentes voies de signalisation et a l'induction de genes precoces. Les mecanismes conduisant a l'activation de la p13k dans les lymphocytes t stimules par l'il-2 etant peu connus, mon travail a consiste a caracteriser et a identifier des proteines phosphorylees sur tyrosine, associees a la sous-unite p85 de la p13k, en reponse a l'il-2. Nous avons montre la phosphorylation des produits des proto-oncogenes cbl et crkl et leur association a p85 dans des lymphocytes t et nk. Ces interactions sont regulees par l'il-2 et font intervenir les domaines sh3 et sh2 de p85. La proteine p120cbl pourrait representer la molecule necessaire au recrutement et a l'activation de p13k dans la signalisation il-2. L'association de p13k avec crkl represente un premier element de liaison entre les voies d'activation des tyrosines kinases et la regulation du cytosquelette par les proteines de la famille ras. Dans une seconde partie, nous avons montre la phosphorylation sur tyrosine d'une proteine d'un poids moleculaire apparent de 97 kda. Pp97 s'associe directement aux domaines sh2 de p85 et shp-2 et est responsable de l'interaction entre p85 et shp-2. De plus, pp97 interagit avec crkl et grb2 via leurs domaines sh3. Bien que la sequence de pp97 ne soit pas encore connue, nos resultats indiquent que cette proteine se comporte d'une facon analogue aux proteines d'ancrage irs-1, irs-2 ou gab-1. Nos resultats conduisent a la formulation de nouveaux modeles de regulation de l'activite p13k et a l'integration de nouvelles proteines de transduction dans les voies de signalisation d 1'il-2.