Etude du role de la gtpase rab6 dans la regulation du transport dans l'appareil de golgi des cellules de mammiferes

par OLIVIER MARTINEZ

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Bruno Goud.

Soutenue en 1997

à Paris 11 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Les gtpases de la famille rab sont des regulateurs du transport intracellulaire chez les eucaryotes. Elles sont localisees a la surface des organites des voies de secretion et d'endocytose, ou elles jouent un role dans l'arrimage ou la fusion des vesicules de transport. Je me suis interesse a la caracterisation fonctionnelle d'une de ces proteines, rab6, chez les mammiferes. J'ai tout d'abord participe a une etude visant a identifier les domaines fonctionnels caracteristiques de chaque proteine rab. A cette fin, nous avons reproduit la fonction de rab5 dans rab6, en construisant des chimeres dans lesquelles differents domaines de rab5 remplacaient les domaines correspondants de rab6. Nous avons ainsi demontre que les regions n-terminale, alpha2/l5, alpha3/l7, et c-terminale, sont les domaines qui distinguent fonctionnellement rab5 de rab6. Rab6 est localisee a la surface des membranes de l'appareil de golgi et du reseau-trans-golgien. En surexprimant transitoirement rab6 sauvage ou des mutants de cette proteine affectes dans leurs proprietes de fixation et d'hydrolyse du gtp, j'ai demontre que les formes actives de rab6 ralentissaient specifiquement le transport des glycoproteines au niveau de l'appareil de golgi. Cet effet s'accompagne d'une redistribution des proteines golgiennes dans le reticulum endoplasmique, un phenomene qui requiert l'integrite du reseau de microtubules. Inversement, un mutant de rab6 lie au gdp, qui ne provoque pas de redistribution des enzymes golgiennes dans le reticulum, inhibe probablement le recyclage de ces proteines entre les etages distaux et proximaux du golgi. Ces resultats suggerent que rab6 est un facteur limitant d'un transport retrograde intra-golgien dependant des microtubules. Ce role possible de rab6 s'accorde bien avec la mise en evidence que nous avons faite, d'une interaction physique et fonctionnelle entre rab6 et une nouvelle proteine de la famille des kinesines localisee a la surface des membranes golgiennes.

  • Titre traduit

    Study of the role of the rab6 gtpase in the regulation of intra-golgi transport in mammalian cells


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