Synthèse et utilisation de latex aminés comme supports pour l'adsorption et le couplage d'oligodésoxyribonucléotides

Synthesis of aminated latex particles and their use for the adsorption and the covalent grafting of oligodeoxyribonucleotides

• Auteur / Autrice : François Ganachaud
• Direction : Christian Pichot
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences. Matériaux macromoléculaires
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Lyon 1
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Christian Pichot

Mots clés

Mots clés contrôlés

Latex synthétique

Polystyrène

Absorption et adsorption

Oligonucléotides

Polymérisation en émulsion

Résumé

L'objectif de ce travail a consiste a synthetiser et caracteriser des latex polystyrene amines, afin d'etudier l'adsorption et le couplage d'oligodeoxyribonucleotides (odn) sur ces supports. Dans un premier temps, la synthese de latex a ete effectuee par copolymerisation en emulsion, sans tensioactif, du styrene et d'un monomere derive amine sous forme protonee, l'hydrochlorure d'aminomethylstyrene, en presence d'un amorceur egalement cationique, le dihydrochlorure de 2,2' azobis (2-amidino propane). L'ajout de monomere fonctionnel en debut de polymerisation a permis le controle de la taille des particules, alors qu'un second ajout a forte conversion a conduit a une meilleure incorporation de surface. La caracterisation moleculaire et colloidale de ces latex a aide notamment a comprendre les mecanismes de polymerisation. En complement, des mesures d'angles de contact sur ces latex ont montre le caractere assez hydrophobe de l'interface particulaire. Dans une seconde partie, l'etude d'adsorption d'un odn modele a ete menee en fonction de divers parametres (ph, force ionique, presence d'un tensioactif non ionique. . . ). Une forte affinite entre le latex amine et l'odn a ete mise en evidence, les interactions etant majoritairement electrostatiques. Une adsorption non specifique, due a des interactions dispersives, a egalement ete demontree en rendant hydrophile la surface du latex par adsorption d'un tensioactif non ionique, le triton x 405. Enfin, le couplage de differents odn a ete realise par l'intermediaire d'une molecule bifonctionnelle, le 2,4 phenylene diisothiocyanate. Le couplage s'est avere favorise soit lorsque les bases nucleiques de l'odn reagissaient avec cet agent de couplage, soit en presence d'une adsorption residuelle. Une etude de conformation de surface par diffusion de neutrons a montre que l'odn adoptait une conformation etalee sur la surface, ce qui a ete confirme par une etude d'hybridation de l'odn suivie par transfert d'energie de fluorescence.