Etablissement d'une cryobanque de semence ou d'embryons pour la conservation ex situ de la diversité génétique chez les mammifères domestiques : l'exemple du lapin (Oryctolagus Cuniculus)

= Preservation of genetic diversity in domestic animals : cryo-banking of embryos to preserve ex situ a model species : the rabbit (Oryctolagus Cuniculus)

• Auteur / Autrice : Thierry Joly
• Direction : Yves Ménézo
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Génétique
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Lyon, INSA
• Ecole(s) doctorale(s) : École Doctorale Interdisciplinaire Sciences-Santé (Villeurbanne1995-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : LB – Laboratoire de Biologie (Lyon, INSA1962-1985)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Banques de sperme

Embryons

Cryoconservation

Résumé

L'établissement d'une cryobanque de semence et d'embryons peut constituer aujourd'hui une aide précieuse pour garantir le maintien de la diversité génétique animale et la protection des populations menacé d'extinction. Nous avons entrepris d'établir une telle banque chez le lapin, espèce à la fois d'intérêt zootechnique, mais aussi modèle pour la recherche biomédicale. -Dans un premier temps, nous avons appliqué les méthodes de congélation de semence et d'embryons sur un large éventail de populations, choisies pour représenter la diversité génétique chez le lapin. L'efficacité de nos techniques est semblable, en moyenne 350 à 400 lapereaux étant produits à partir de 100 doses de semence ou 100 paillettes de 10 embryons congelés. Cependant, les variabilités entre populations observées sur nos résultats de production de semence et d'embryons sont importantes; elles varient de 1 à 3 et ne sont pas maîtrisables. Pour des raisons d'ordre pratique et sanitaire, les coûts de cryopréservation étant identiques pour les deux types cellulaires, nous avons pris le parti de conserver en priorité les embryons, le moyen le mieux adapté pour conserver les ressources génétiques chez le lapin. L'utilisation du traitement de super-ovulation des femelles peut être appliquée en routine pour augmenter la production d'embryons (18,5 embryons congelés par donneuse). - Dans un deuxième temps, nous avons proposé une démarche pour définir 1' échantillon à conserver pour chaque population : taille de l'échantillon, choix des animaux reproducteurs et des accouplements. Le raisonnement s'exprime de façon différente suivant l'objectif de conservation, un 'gène' ou une 'population'. Nous estimons que 120 embryons congelés (12 paillettes) est un échantillon de taille suffisante pour conserver un gène. Lorsque l'objectif est la conservation d'une population, nous avons défini trois paramètres d'échantillonnage simples qui nous permettent de fixer la taille de l'échantillon et d'évaluer l'échantillon d'embryons stockés. Dans le cas de la conservation d'une race, nous avons à échantillonner au moins 15 mâles et 30 femelles et conserver 330 embryons congelés. Dans le cas d'une souche sélectionnée, la taille de 1' échantillon sera variable suivant les caractères considérés.

The establishment of a cryobank of gametes and embryos would be useful to maintain animal genetic diversity and protect populations threatened from extinction. We have started to establish such a bank using the rabbit as a model: a species which is of interest from both zoo-technical and biomedical point of view. First, we have applied the technics of semen and embryos cryopreservation to a large spectrum of populations, which represent most of the rabbit genetic diversity. Our techniques for freezing semen and embryos can be used routinely to store rabbit genetic resources, although individual and genotypic variabilities observed on our results of semen and embryos production were almost uncontrollable. We have preferentially chosen to freeze embryos and used the superovulation treatment of does, for practical and sanitary reasons, as the efficiency and costs of both techniques were similar. Secondly, we were able to define the sample size and sampling of the animals to be mated in order to get off springs from cryopreserved embryos, which will constitute the next generation. Sample is defined according to the objective of conservation, a 'gene' or a 'population', and the level of information. This approach based on simple parameters should help the practitioners which are implied in the actions of preservation of animal genetic resources to rationalize their decisions concerning sampling of individuals making up the population to be preserved.