Thèse soutenue

Interaction fonctionnelle entre le cytosquelette et la voie secretoire au niveau de l'etape re/golgi chez saccharomyces cerevisiae

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Auteur / Autrice : EMMANUEL GACHET
Direction : Claude Gaillardin
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1997
Etablissement(s) : Paris, Institut national d'agronomie de Paris Grignon

Résumé

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La voie secretoire met en relation des organites secretoires comme le reticulum endoplasmique (re) et l'appareil de golgi (golgi) probablement grace a un intermediaire vesiculaire. Ainsi, sec23 et sec18 controlent respectivement la formation et la fusion des vesicules. La perturbation de ce trafic vesiculaire intracellulaire, par des drogues ou des mutations, a revele l'extreme labilite des structures membranaires. J'ai cherche a expliciter le lien qui peut exister entre le cytosquelette et le transport proteique, entre le re et le golgi, chez la levure saccharomyces cerevisiae. Les microtubules sont des polymeres de tubulines et (la tubuline etant le produit du gene tub2). J'ai ainsi etudie le gene uso1 qui est implique dans le transport proteique entre le re et le golgi, et dont le produit est une proteine putative du cytosquelette. L'analyse ultrastructurale du mutant uso1 indique un defaut dans le maintien de l'integrite du re tubulaire polygonal, une forme differenciee du re supposee produire les vesicules. De plus, les mutations uso1 et tub2 montrent une letalite synthetique, suggerant que uso1 pourrait agir conjointement avec les microtubules. L'analyse ultrastructurale des simple-mutants et des double-mutants revele que la mutation sec23 est epistatique sur la mutation uso1 ou tub2, laquelle est a sont tour epistatique sur la mutation sec18. Enfin, le nocodazole, une drogue depolymerisant les microtubules, a des effets similaires a la mutation tub2, c'est-a-dire qu'elle empeche l'accumulation de vesicules par sec18. Donc uso1 et les microtubules agissent a une etape proche sinon identique, entre le bourgeonnement vesiculaire et la fusion, dans le transport proteique du re au golgi. Cependant, la depolymerisation des microtubules, par une mutation ou une drogue, n'altere pas la cinetique de la maturation post-traductionnelle des proteines secretoires, ni ne bloque l'exportation des proteines excretees. Il apparait que les microtubules ne sont pas indispensables pour le transport proteique dans la levure bien qu'ils jouent un role dans le trafic vesiculaire conjointement avec uso1.