Isolement, caractérisation et étude de gènes impliqués dans les phases précoces du traitement de cellules et de plants de tabac par la cryptogéine, un éliciteur de réactions de défense

Isolation, characterization and study of genes involved in early steps of treatment of tobacco cells and plants by cryptogein, an elicitor of defense reactions

• Auteur / Autrice : Anne-Sophie Petitot
• Direction : Lydie Suty
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie, biologie cellulaire et moléculaire
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Dijon

Mots clés

Mots clés contrôlés

Éliciteurs

Endopeptidases

Nécrose

Mort cellulaire

Nicotiana tabaccum

Résumé

Ce travail concerne la recherche et la caractérisation de gènes dont l'expression est modifiée rapidement par le traitement de cellules de tabac en culture par la cryptogéine, un éliciteur protéique de réactions de défense. Le différentiel display d’ARNm a permis d'isoler 16 fragments d’ADNc correspondant à des gènes actives ou inactives pendant le traitement de cellules de tabac par la cryptogéine pendant 1 h. Ces ADNc (100 a 350 Pb) correspondent à l'extrémité 3' en grande partie non codante des ARNm. Leur séquençage n'a pas permis de dégager des homologies de séquences suffisamment fiables. Par 5'race, 4 ADNc de grande taille dont 2 pleine longueur ont été obtenus à partir de ces fragments. Parmi eux, TCI 7 (tabac cryptogéine induit) code une sous-unité de protéasome et TCI 14 code une protéine SR de type transformer-2. Il s'agit du premier clonage d’ADNc codant ces protéines chez les plantes. Dans des cellules de tabac en culture, TCL 7 est active 30 min après l'addition de cryptogéine et TCI 14 est active transitoirement avec un pic à 30 min. Dans des plants de tabac, ces activations sont retrouvées légèrement décalées dans le temps. Chez les animaux, le protéasome est impliqué dans la mort cellulaire programmée ou non. L'observation microscopique de cellules de tabac traitées par la cryptogéine a montré que la mort cellulaire intervient tardivement (après 48 h) et serait de type nécrose. L'activation précoce de TCI 7 ne semble pas être associée directement à la mort cellulaire. L'activation deTCI 14 semble être provoquée par la production des FAO et TCI 14, comme les protéines SR animales, pourrait intervenir dans l'épissage de pré-ARN spécifiques. Enfin, les gènes TCI 7 et TCI 14 ont été séquencés partiellement par marche sur le gène par PCR sans toutefois obtenir la séquence des promoteurs. De par la nature des gènes isolés, ce travail ouvre des perspectives passionnantes pour l'étude de la mise en place des réactions de défense chez les plantes.