Polymerisation de l'actine et motilite cellulaire : mouvement de listeria monocytogenes dans les extraits cytoplasmiques d'ufs de xenopes

Actin assembly and cell motility: movement of listeria monocytogenes in xenopus eggs extracts

• Auteur / Autrice : Jean-Baptiste Marchand
• Direction : Marie-France Carlier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

La polymerisation de l'actine est le moteur de divers phenomenes de motilite cellulaire (changement de forme, mouvement de reptation sur un support,). Les bacteries l. Monocytogenes et s. Flexneri reprennent a leur compte ce mecanisme pour se deplacer dans le cytoplasme des cellules qu'elles infectent. Nous avons mis au point un test de motilite de l. Monocytogenes dans les extraits cytoplasmiques d'uf de xenope. Ce systeme permet a la fois l'etude du mecanisme de la polymerisation de l'actine in vivo et l'etude des facteurs bacteriens et cellulaires impliques dans le mouvement. Ainsi nous avons pu mettre en evidence que: - la polymerisation de l'actine derriere la bacterie resultait d'un changement local d'etat stationnaire d'assemblage de l'actine. L'actine f et l'atp sont necessaires au maintient de la difference de concentration critique entre le milieu et la bacterie. La profiline n'est pas necessaire a ce mecanisme. - la fixation de poly-l-proline a la profiline ne modifie pas ses proprietes d'interaction avec l'actine. - acta et icsa sont les facteurs bacteriens necessaires et suffisants, respectivement, au mouvement de l. Monocytogenes et de s. Flexneri. . - c'est le domaine nt d'acta qui est essentiel au mouvement, le domaine central riche en proline ne joue qu'un role d'activateur de l'assemblage. - enfin nous avons produit une proteine de fusion gst-ntacta dans le but de purifier le ligand du domaine nt d'acta par chromatographie d'affinite