Thèse soutenue

Régulation mécanique de l'activité du canal sodium sensible à l'amiloride du lymphocyte B humain : mise en évidence et étude des mécanismes cellulaires impliqués
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Auteur / Autrice : Jean-Michel Achard
Direction : Albert Fournier
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Génie Enzymatique, Bioconversion, Microbiologie
Date : Soutenance en 1996
Etablissement(s) : Compiègne
Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale 71, Sciences pour l'ingénieur (Compiègne)

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Résumé

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La mécanosensibilité du canal sodium sensible à l’amiloride a été étudiée sur des lymphocytes humains immortalisés par le virus d'Epstein-Bad. Les conductances ioniques ont été mesurées par la technique du patch-clamp en configuration cellule entière. La stimulation mécanique induite par l'augmentation de la pression hydrostatique au dessus des cellules examinées entraine une augmentation soudaine et réversible des courants sensible à l’amiloride à partir d'une valeur seuil de 2 à 5 mm d'eau. La stimulation induite par la pression était accompagnée d'une diminution de la sensibilité à l'amiloride et de la séléctivité cationique du canal. Lorsque le canal sodium était stimulé par 1 'AMPc, la pression hydrostatique entrainait une inhibition paradoxale des courants sodiques. Réciproquement, l'addition d'AWc était responsable d'une inhibition des courants stimulés par la pression. Des résultats similaires étaient observés lorsque des variations de la pression osmotique étaient utilisées pour activer le canal sodium. Le rôle du cytosquelette dans la réponse à la pression était mis en évidence par l'absence de réponse à la stimulation mécanique des cellules prétraitées par la colchicine et la cytochalasine B. L'analyse des résultats obtenus en faisant varier les concentrations et les temps d'exposition de différents inhibiteurs de la polymérisation de l'actine suggére que la régulation du canal par la pression est dépendante des microfilaments d'actine et d'une protéine Gi, alors que sa régulation par l' c est dépendante de la phosphorylation de courts oligomères d'actine. En apportant la preuve qu'une stimulation mécanique peut moduler les régulations biochimiques induites par les hormones contrôlant l'ouverture d'un canal ionique dans un type cellulaire n'exprimant aucune fonction mécanosensible connue, ces résultats invitent à une réflexion sur la signification physiologique des canaux mécanosensibles, qui nous conduit à proposer le concept plus général de canaux contrôlés par le cytosquelette (cytoskeleton-gated channels).