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Thèse soutenue

Etude de films mixtes d'acide gras et d'enzyme élaborés par la technique de Langmuir-Blodgett

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Auteur / Autrice : Nicolas Dubreuil
Direction : Jean-Marc Valleton
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Chimie
Date : Soutenance en 1995
Etablissement(s) : Rouen

Résumé

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Le but de ce travail a été de caractériser des films mixtes acide gras/enzyme élaborés par la technique de Langmuir-Blodgett. L'acide gras utilisé est l'acide béhénique (AB) et l'enzyme est la glucose oxydase (GOx). Les études sur le film à l'interface eau/air (isothermes de compression, stabilité, hystérésis, microscopie à l'angle de Brewster) ont montré que l'enzyme s'adsorbait entre les molécules d'acide béhénique et sous le film, ce qui a pour effet de stabiliser le film. Ces études ont aussi permis de mettre au point un protocole d'élaboration du film mixte à l'interface. Les spectroscopies IR et UV-Vis ont permis de quantifier les deux espèces. La quantité d'enzyme déterminée indique que l'enzyme présente dans le film LB provient principalement de l'enzyme présente à l'interface, ce qui montre que les interactions AB/GOx sont faibles. La microscopie à force atomique montre qu'à l'échelle micrométrique, les échantillons préparés par les techniques de transferts vertical et horizontal sont hétérogènes. Les échantillons préparés sur graphite laissent apparaître des agrégats enzymatiques. A l'échelle nanométrique, nous avons observé l'arrangement des molécules de GOx présentant une organisation en quasi cristaux 2D et mis en évidence l'arrangement des molécules d'acide béhénique sur les molécules de GOx. Les échantillons préparés sur mica se caractérisent par la présence d'une monocouche d'acide béhénique et d'agrégats enzymatiques non recouverts par l'acide béhénique. Il apparaît que la structure des échantillons préparés sur mica est plus proche de la structure du film à l'interface eau/air que celle des échantillons préparés sur graphite