Recherche Avancée

Thèse soutenue

Structure du nucleosome et ses implications pour la superstructure de la chromatine

FR  |  
EN
Auteur / Autrice : Ali Hamiche
Direction : Ariel Prunell
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1995
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

FR

Cette these a ete consacree a l'etude de la structure du nucleosome et plus particulierement au probleme du nombre de tours d'adn enroule autour du nucleosome. Ce nombre de tours est admis generalement etre egal a deux, bien qu'il s'agisse la d'une supposition basee sur la structure cristallographique du cur du nucleosome. Nous avons aborde ce probleme d'une maniere originale, en reconstituant un nucleosome unique sur un minicercle d'adn et sur un petit fragment lineaire. La mesure du deroulement thermique de l'adn associe aux histones dans le meme nucleosome circulaire montre que seulement 109 pb sont en interaction avec celles-ci, ce qui correspond a 1,3 tour d'adn enroule autour du nucleosome. Dans ce cas, les adn entrant et sortant du nucleosome ne sont pas croises. L'addition de h5 a ces mononucleosomes est accompagnee d'une augmentation importante de la reduction du nombre d'enlacements (|lk|), qui passe de 1 a 1,75 ainsi que d'une forte acceleration des mobilites electrophoretiques sur gel. Ceci confirme qu'avant addition de h5 le nucleosome contenait moins de 2 tours d'adn. Nous avons egalement montre que la queue c-terminale de h5 interagit en meme temps avec les 2 adn entrant et sortant du nucleosome pour former une structure a 4 brins, inconnue jusqu'alors. D'autre part l'observation des mononucleosomes, cette fois lineaires, par microscopie cryo-electronique confirme l'absence de croisement. L'ensemble de ces resultats definit non seulement la topologie reelle de l'adn sur le nucleosome, mais, en montrant la fonction exacte de la queue c-terminale de h5, impose des contraintes precises pour la formation de la superstructure chromatinienne