Identification et caracterisation d'une nouvelle isoforme du fibroblast growth factor-2 et de ses roles possibles au cours de l'embryogenese aviaire

A novel fibroblast growth factor-2 isoform and its possible roles during avian embryogenesis

• Auteur / Autrice : AIMEE ZUNIGA MEJIA BORJA
• Direction : R. ZELLER
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Le facteur de croissance peptidique fgf-2 (basic fgf) appartient a une famille de neuf membres caracterises par leur mitogenicite et leur grande affinite pour l'heparine ; ce sont les ligands de recepteurs-tyrosine kinases transmembranaires. Les fgf's jouent un role tres important au cours du developpement embryonnaire et dans l'etablissement du plan d'organisation des vertebres (induction du mesoderme, ebauche des membres etc. ). J'ai caracterise trois classes de transcripts du fgf-2 aviaire et analyse leur distribution chez l'embryon et chez l'adulte en utilisant les techniques de northern blot et de protections a la rnase. Notamment j'ai isole une nouvelle classe de transcripts, altfgf-2, produits par epissage alternatif du premier exon codant et pouvant en theorie coder pour une nouvelle proteine isoforme de fgf-2. Le messager altfgf-2 est exprime au cours de l'embryogenese aviaire mais non dans les tissus adultes ce qui suggerait que la proteine correspondante pourrait jouer un role particulier dans l'etablissement du plan d'organisation des vertebres. La production d'anticorps specifiques pour l'exon alt m'ont permis de montrer que le transcript altfgf-2 codait pour une proteine de 21. 5 kd dans l'embryon. L'etude par immunofluorescence de la localisation subcellulaire de la proteine a revele que, contrairement au fgf-2 classique, la proteine altfgf-2 etait toujours situee dans le cytoplasme, et plus particulierement dans le reticulum endoplasmique des cellules en culture. L'etude de la repartition spatiale et temporelle d'altfgf-2 dans l'embryon a montre que la proteine etait exprimee par les memes structures que le fgf-2 classique (tube neural, notocorde, myotomes, ebauches des membres et nephros) mais de facon plus restreinte. En particulier, dans le tube neural, la proteine est exprimee par les neurones moteurs lors de leur differenciation. L'expression de la proteine altfgf-2 restreinte a la region ventrale du tube neural s'inscrit dans le modele des inductions qui conduisent a l'etablissement de la polarite dorso-ventrale du tube neural. Ces resultats impliquent la proteine altfgf-2 dans le processus de differenciation des neurones moteurs et representent le premier exemple d'une proteine fgf plus specifiquement embryonaire et produite par epissage alternatif