Premier multi-immunodosage simultane par carbonylmetalloimmunoassay (cmia) utilisant l'infra-rouge a transformee de fourier comme methode de detection. Application au dosage simultane de trois medicaments antiepileptiques

par Anne Varenne

Thèse de doctorat en Sciences médicales

Sous la direction de Gérard Jaouen.

Soutenue en 1994

à Paris 6 .

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  • Résumé

    Un des defis actuels dans le domaine de l'immunoanalyse concerne la mise au point de multi-dosages simultanes de substances presentes dans un fluide biologique. Ceci necessite l'emploi de traceurs differents pour chaque analyte a doser mais qui sont quantifiables simultanement par une technique analytique appropriee. L'immunodosage non-isotopique carbonylmetalloimmunoassay (cmia), developpe recemment, utilise comme traceurs des complexes metal-carbonyles qui sont detectes par ir-tf. Les bandes de vibration co en ir de chaque traceur etant intenses et caracteristiques de l'entite metal-carbonyle, nous avons envisage l'elaboration d'un multi-immunodosage par cmia en serie des substances antiepileptiques. Apres la mise au point du mono-dosage des trois medicaments antiepileptiques (carbamazepine, phenobarbital et phenytoine) par cmia, nous avons etudie les deux conditions majeures necessaires pour l'etablissement d'un multidosage par cmia: la detection simultanee par ir-tf des fractions libres des differents traceurs mis en jeu et realisation simultanee des reactions immunologiques des anticorps specifiques avec leurs antigenes associes. La premiere concerne la determination, a partir du spectre ir d'un melange de traceurs presentant un recouvrement de leurs bandes caracteristiques, de la quantite en chacun des complexes. Grace a des algorithmes matriciels de type moindres carres classiques (cls) ou moindres carres partiels (pls), nous avons detecte quantitativement et simultanement avec moins de 5% d'erreur un melange de trois a cinq entites metal-carbonyles en quantites similaires a celles du dosage par cmia (10-1000 pmol). La seconde consiste en l'etude des interactions parasites possibles entre les reactifs (trois medicaments, trois traceurs et trois anticorps) incubes simultanement: pour les medicaments testes, aucune interaction parasite n'est mise en evidence et les courbes d'etalonnage sont identiques par mono-dosage ou multi-dosage. Ainsi, le multi-dosage par cmia des trois medicaments antiepileptiques a ete effectue avec succes, et les outils matriciels cls et pls s'averent interessants pour l'automatisation d'un tel multi-dosage

  • Titre traduit

    First simultaneous multi-immunoassay by carbonylmetalloimmunoassay (cmia) using the transform fourier infra-red (ftir) spectroscopy as method of detection. Application to the simultaneous assay of three antiepileptic drugs


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  • Détails : 256 P.
  • Annexes : 119 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1994
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