Influence des modifications de la composition lipidique des membranes sur les mécanismes régulateurs de la réponse lympho-proliferative

= Modification in the lipid composition of membranes and their effects on regulatory mechanisms involved in the lymohoproliferative response.

• Auteur / Autrice : Catherine Joulain
• Direction : Annie-France Prigent
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Lyon, INSA
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Interdisciplinaire Sciences-Santé (Villeurbanne ; 1995-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : LCB - Chimie Biologique (Lyon, INSA)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Glutathione peroxidase

Concanavaline A

Lymphocytes -- Immunologie

Résumé

De nombreuses modification de la menbrane lipidique apparaissent dès les premières minutes de l'activation mitogénique. Plusieurs études ont montré que 1es acides gras peuvent agir sur de nombreuses. étapes de la signalisation cellulaire. Ceci nous a conduit à examiner l'effet de différents acides gras polyinsaturés des séries n-6 et n-3 ainsi que 1'effet d'un acide gras mono hydroxylé (le 12-HETE) apportés in vitro à des cellules mononucléées humaines, sur les paramètres biochimiques précoces de l'activation mitogénique. Nous avons tout d'abord montré que ces différents acides gras s'incorporent efficacement dans les phospholipides des cellules mononucléées humaines, et que cette estérification peu influencer la réponse proliférative de ces cellules induite par la ConA. En absence de stimulation mitogénique, les acides gras stimulent l'activité phosphodiestérase (PDE) basale, et, par contre, 1 diminuent notablement la réponse positive de la PDE à la ConA, les acides gras n-3 étant plus actifs que les n-6. Le 12-HETE montre des effets semblables à ceux des acides gras n-3 sur l'activité PDE Le potentiel redox cellulaire peut affecter directement ou indirectement la réponse immune. Il nous a semble important de déterminer si l'enrichissement des membranes cellulaires en acides gras polyinsaturés ou en 12-HETE peut en retour modifier l'activité glutathion peroxydase qui assure normalement la réduction des hydroperoxydes d'acides gras en dérivés ,mono-hydroxylés. Seuls les acides gras de la série n-3, le 20:5(n-3) et le 22:6(n-3), augmentent significativement 1 'activité glutathion peroxydase basale des cellules mononucléées, le traitement par la ConA atténuant l'augmentation de l'activité GPx. Enfin, nous avons mis en évidence une possible liaison spécifique du 12-HETE à la surface des cellules mononucléées humaines.

Nuoerous modification of membrane lipids occur during the first minutes of mitogenic activation. Several studies have shown that fatty acids can affect different steps of cellular signalling process. This led us to examine the in vitro effect of some n-3 and n-6 polyunsaturated fatty acids (PUFA) as well as the effect of a monohydroxylated fatty acid (12(5)-hydroxyeicosatetraenoic acid = 12(5)-HETE) upon the early biochemical events of the mitogenic activation of human peripheral blood mononuclear cells (PBMC}. We have first shown that the studied FA are efficiently esterified in the PM phospholipids and that this esterification can affect ConA-inducedlymphoproliferative response. In the absence of mitogen stimulation, fatty acids, especially n-3 species and 12-HETE, enhance basal phosphodiesterase (PDE) activity and, on the other hand, reduce the ConA, positive PDE response. Cellular redox potential can modify, directly or not, the immune response. Thus, in a second titre, we have investigated Whether PUFA 3nd 12-HETE might in turn modify glutathione-peroxidase (GSH-Px) activity, which is key enzyme involved in the reduction of fatty acid hydroperoxides. Only the n-3 fatty acids, more specifically the 20:5n-3 and 22: 6n-3, can significantly enhance basal GSH-Px activity of PBMc, this effect being attenuated by ConA treatment. Finally, xe have shown a possible specific binding of 12-HETE on PBMC membrane.