Thèse de doctorat en Génie enzymatique, bioconversion et microbiologie
Sous la direction de Daniel Thomas.
Soutenue en 1994
à Compiègne , dans le cadre de École doctorale 71, Sciences pour l'ingénieur (Compiègne) .
Le but de notre travail consistait à étudier les protéines de la membrane externe (pme) des bactérioses du groupe fragilis afin de savoir s'il existe des différences entre les profils electrophorétiques des pme des différentes espèces du groupe fragilis, ce qui permettrait ensuite d'utiliser ces profils comme élément de taxonomie. Dans un premier temps, nous avons essayé d'améliorer les techniques d'extraction de ces protéines, celles décrites dans la littérature ne donnant pas satisfaction. Une fois maitrisées, nous les avons appliquées aux souches de bactéroides du groupe fragilis et aux prevotella qui posaient des problèmes d'identification par les procédés classiques. Au cours de cette étude l'analyse des profils protéiques nous avait montré que la souche de bactéroides fragilis 358 résistante à l'imipenème et aux associations inhibiteurs de b-lactamase - b-lactamines avait perdu une protéine de membrane externe. Nous avons pense qu'il pouvait s'agir d'une porine, protéine par laquelle l'antibiotique pénètre dans la bactérie. En partant de cette hypothèse, nous avons essayé d'extraire cette protéine présente chez une souche sensible (b. Fragilis atcc 25285), puis tenter de caractériser son activité en tant que porine. Pour cela, un protéoliposome dans lequel la protéine 45 kda a été incorporée, s'est montré capable de gonfler en présence de sucres ou d'antibiotiques par opposition aux protéoliposomes dans lesquels des protéines de structure sont incorporées. C'est la première fois qu'une protéine de type porine est décrite chez b. Fragilis
Outer membrane proteins in b. Fragilis group strains. Isolation and characterization of a porin like protein in b. Fragilis
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