Thèse soutenue

Caracterisation de la divercine v41 et de la piscicocine v1, bacteriocines produites par carnobacterium divergens v41 et carnobacterium piscicola v1 isolees de produits marins

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Auteur / Autrice : Marie-France Pilet
Direction : Georges Novel
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1994
Etablissement(s) : Caen

Résumé

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Des bacteries lactiques isolees de produits marins (poissons frais conditionnes sous atmosphere modifiee, poissons fumes et marines, contenu intestinal de poissons) ont ete criblees pour la production de bacteriocines. Parmi 336 isolats vingt-deux se sont reveles producteurs de bacteriocines et ont ete identifies notamment a partir de leur morphologie, la presence d'acide meso-diaminopimelique dans leur paroi et leurs temperatures de croissance. Les isolats ont pu etre classes en trois groupes appartenant aux genres carnobacterium, lactococcus et enterococcus selon la classification usuelle. Les souches de carnobacterium ont ete identifiees comme carnobacterium divergens et carnobacterium piscicola par hybridation adn-adn. Les quatre bacteriocines presentent des spectres d'inhibition differents. Celles produites par les souches carnobacterium piscicola et carnobacterium divergens, appelees respectivement piscicocine v1 et divercine v41 sont actives vis a vis de bacteries comme listeria monocytogenes et clostridium tyrobutyricum. La divercine v41 et la 0piscicocine v1 ont ete purifiees a partir de surnageant de culture obtenu en milieu mrs sans tween, a 20c et a ph regule 6,5. La purification a ete realisee par precipitation au sulfate d'ammonium et chromatographie en phase inverse c18. La divercine v41 est un peptide de 4509 da comprenant environ 44 residus d'acides amines dont 38 ont ete determines. La purification de la piscicocine v1 a montre la presence d'au moins deux peptides appeles piscicocine v1a et v1b qui ont ete sequences partiellement. Les trois bacteriocines presentent des similitudes de sequences avec le groupe des bacteriocines anti-listeria. Le gene de structure de la divercine v41 a ete clone et sequence en partie. Cette bacteriocine est synthetisee sous forme d'un precurseur comprenant une sequence d'extension n-terminale de 23 residus qui se separe de la bacteriocine mature au niveau d'un site gly-gly, caracteristique des bacteriocines de bacteries lactiques non-lantibiotiques