La proteine vp6 du rotavirus bovin : proprietes structurales, fonctionnelles et topologiques

The bovine rotavirus bp6 protein : structural, functional and topologic properties

• Auteur / Autrice : Gwenola Tosser
• Direction : Jean Cohen
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Les rotavirus sont des agents etiologiques majeurs des gastro-enterites virales. Ils appartiennent a la famille des reoviridae sont constitues de 3 capsides proteiques et de 11 segments d'arn bicatenaire. La proteine de la capside interne, vp6, est impliquee dans l'activite transcriptase des particules a simple capside bien qu'elle n'ait pas d'activite polymerase intrinseque. Les proteines vp6a (souche bovine rf) et vp6c (souche cowden) ont ete exprimees dans le systeme baculovirus. Ces proteines recombinantes ont ete purifiees et leur etude a permis de determiner que les trimeres de vp6c sont constitues de monomeres stabilises par des ponts disulfure intra-chaine et sont sensibles au ph. Les proprietes des oligomeres de taille superieure au trimere ont egalement ete etudiees. Les proteines vp6a et vp6c sont capables de s'assembler, en cellules d'insectes, sur des pseudo-cores de rotavirus. La proteine vp6a purifiee est capable de restaurer l'activite polymerase de cores de rotavirus tandis que vp6c en est incapable, vp6a et vp6c ne sont pas capables de former des heterotrimeres. Ces resultats montrent une conservation entre les souches des sites responsables de l'interaction de vp6 avec vp2 tandis que les proprietes de restauration de l'activite polymerase et de formation des trimeres mettent en jeu des sequences plus variables. Un test de type elisa permet d'etudier l'interaction de vp6 avec des mutants de deletion de vp2 et de faire l'hypothese de sites multiples d'interaction de vp2 avec vp6. La carte epitopique de vp6a a ete realisee dans le systeme biacore avec differents anticorps monoclonaux antivp6 (pothier et coll. , 1987). La reaction de ces anticorps monoclonaux a ete etudiee sur des particules virales, la localisation des differents epitopes de vp6 sur les particules virales, les multimeres de vp6 et le monomere de vp6 est discutee