Isolement et caracterisation de mutants de regulation de la voie d'assimilation du nitrate chez nicotiana plumbaginifolia

Isolation and characterization of regulatory mutants of nitrate assimilation pathway in nicotiana plumbaginifolia

• Auteur / Autrice : Jean-Denis Faure
• Direction : Michel Caboche
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

La reduction du nitrate necessite l'intervention de la nitrate reductase (nr) et de la nitrite reductase (nir) qui respectivement reduisent le nitrate en nitrite puis en ammonium. Pour pouvoir isoler des mutants affectes dans la regulation de l'expression de la nr, nous avons developpe un systeme de contre-selection devant nous permettre de contre-selectionner les mutants structuraux. Ce systeme repose sur l'utilisation du gene rapporteur aux 2 conferant la sensibilite a l'indole acetamide. Nous avons par ailleurs montre que la nir possede des regulations similaires a celles de la nr et que l'expression de ces deux genes est co-regulee par un produit en aval de la voie. En utilisant un nouveau crible de selection, nous avons isole un nouveau mutant nomme ems 203. 6, sensible a un rapport carbone/azote eleve dans le milieu de culture. Ce phenotype est associe avec des anomalies de developpement et de reponse aux cytokinines. Nous avons montre que le mutant appartient au groupe de complementation zea conferant la sensibilite a la zeatine. Ces phenotypes sont associes avec l'accumulation d'acide amines, de sucres et d'acides organiques qui provoquent l'extinction de l'expression des genes des metabolismes azotes et carbones regules par la lumiere, et en particulier la nr et la nir