Expression et regulation transcriptionnelle des genes latents du virus epstein-barr

Expression and transcriptional regulation of the epstein-barr virus latent genes

• Auteur / Autrice : BRIGITTE KERDILES-KERBAOL
• Direction : P. COHEN
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Le virus epstein-barr (ebv) est un virus herpes associe a plusieurs affections malignes chez l'homme. La caracterisation d'adnc ebv, completee par des experiences de cartographie a la rnase, a montre l'existence d'une transcription complexe dans cette region bamhi e du genome viral. Un vecteur d'expression transitoire a ete construit avec l'un des adnc, qui contenait un cadre ouvert de lecture genere par un epissage. Des experiences de western blot et d'immunofluorescence ont montre que le plasmide recombinant est capable d'exprimer une proteine identique a l'antigene viral ebna3b. D'autres adnc revelent l'existence d'un transcrit antisens et indiquent que les transcrits ebna3b et ebna3c seraient generes a partir d'un transcrit primaire commun. L'antigene viral ebna2 est un trans-activateur de plusieurs genes cellulaires et viraux dont ceux des proteines membranaires tp1, tp2 et lmp. Dans une seconde partie j'ai teste si les trois autres antigenes nucleaires ebna-3a, -3b et -3c, comme l'ebna2, sont capables de reguler l'activite des promoteurs ebv. Des plasmides contenant les promoteurs des genes tp1, tp2 ou lmp en amont du gene rapporteur cat, ont individuellement ete co-transfectes avec differentes combinaisons de vecteurs ebna. En presence d'ebna2, les proteines ebna3 s'averent reduire l'activite de chacun des promoteurs. Comme aucun effet n'a pu etre observe sur plusieurs promoteurs heterologues, l'ebna2 ou/et des elements transcriptionnels qui sont specifiques des promoteurs ebv sont indispensables a l'activite ebna3. L'expression de cat dirigee par de sequences promotrices tp1 deletees a ete testee en presence ou non des antigenes ebna2 et ebna3c. Des elements en cis repondant a l'ebna2 et a l'ebna3c ont ete colocalises sur une sequence de 81 pb. Les proteines ebna3s pourraient etre des antagonistes de l'activation transcriptionnelle par l'ebna2 et joueraient un role primordial dans la biologie du virus