Thèse soutenue

Application du transfert de gène inter-espèces à l'étude de la régulation des gènes de Bombyx codant pour les protéines de la soie

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Auteur / Autrice : Bruno Bello
Direction : Pierre Couble
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences
Date : Soutenance en 1992
Etablissement(s) : Lyon 1
Jury : Examinateurs / Examinatrices : Pierre Couble

Résumé

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Dans les cellules posterieures de la glande sericigene de bombyx, la transcription des genes codant pour les proteines de la soie p25 et fibroine est constamment ajustee sur le plan quantitatif, tout en etant soumise au meme cycle de repression et derepression, lie aux phases de mues et d'intermues. L'etude des mecanismes de regulation des deux genes a ete aborde in vivo par transgenese chez la drosophile. Les sequences 5 flanquantes des genes de p25 et de la fibroine ont ete couplees sous des formes diverses au gene lacz d'e. Coli puis introduites, via l'element p, dans le genome de cet organisme. Nous montrons que les genes-fusion p25-lacz et fibroine-lacz sont exprimes dans un meme territoire de la glande salivaire. Cette regionalisation de l'expression dans l'organe homologue de la glande sericigene suggere que les elements cis- et trans-regulateurs ont ete conserves entre le ver a soie et la drosophile, et conforte l'hypothese de mecanismes communs de regulations pour les deux genes. Les sequences -441 a +73 du gene de p25 gouvernent strictement l'expression regionale du gene rapporteur lacz, au cours du developpement larvaire et prepupal. La deletion des sequences en amont de la position -165 abolit l'expression du transgene revelant ainsi un element cis-regulateur essentiel dans le domaine -441/-165. L'expression regionale du gene fusion fibroine-lacz est, par contre, restreinte au developpement prepupal et concerne un nombre variable de cellules. De plus, ce gene fusion est exprime dans divers tissus et est soumis a un important effet de position suggerant que des elements essentiels pour l'etablissement de la structure chromatinienne du gene de la fibroine n'auraient pas ete introduites dans le montage genique teste