Thèse soutenue

Physiologie de croissance de souches de Claviceps : production d'alcaloi͏̈des par fermentation en milieu solide

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Auteur / Autrice : Maria del Refugio Trejo Hernandez
Direction : Jean-Louis Garcia
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biologie cellulaire. Microbiologie
Date : Soutenance en 1992
Etablissement(s) : Aix-Marseille 1

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Résumé

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Dans le cadre de ce travail, nous avons compare la croissance et la production d'alcaloides de l'ergot du seigle par claviceps purpurea et claviceps fusiformis en culture en milieu solide (fms) et en milieu submerge (fsm). L'etude de la biosynthese d'alcaloides par ces souches a ete realisee en variant les conditions environnementales et la composition du milieu de culture. Ces facteurs se sont reveles tres importantes lors de la biosynthese d'alcaloides, aussi bien sur les rendements de production que sur le profil d'alcaloides produits. L'analyse des gaz a constitue un outil performant pour evaluer l'adaptation des souches a la culture en milieu solide. Cette technique nous a permis d'etablir les conditions de culture en fms et de suivre en continu l'evolution de la croissance en fonction du co2 degage. L'utilisation de la methodologie des plans d'experiences, nous a permis de preciser l'influence des differents facteurs etudies. Ainsi, la source de carbone, la source d'azote, l'aeration, le phosphate inorganique et l'addition de precurseurs (tryptophane, valine, proline) se sont reveles comme les facteurs principaux ayant des effets preponderants sur la biosynthese d'alcaloides. En particulier, le role du tryptophane comme precurseur de la biosynthese a ete amplement confirme, de meme que l'effet stimulateur de la saccharose. Il a ete clairement mis en evidence que les variations observees dans le spectre d'alcaloides produits sont directement liees a la composition du milieu de culture et a la technique de culture utilisee. Le rendement en alcaloides totaux exprime par rapport a la biomasse est plus eleve en fms qu'en fsm, d'un facteur 3 pour c. Purpurea (23. 58 mg/g de biomasse ps) et 10 pour c. Fusiformis (187. 86 mg/g de biomasse ps) apres 200 heures de culture. La culture en fms sur support impregne s'est averee tres interessante pour la production de metabolites secondaires a haute valeur ajoutee