Proteines essentielles dans le mecanisme de secretion des cellules chromaffines : caracterisation et role de la calpactine

par TRISTAN SARAFIAN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées

Sous la direction de Dominique Aunis.

Soutenue en 1991

à Strasbourg 1 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Afin de mieux etudier les mecanismes moleculaires precedant la secretion des catecholamines par exocytose, des techniques originales de permeabilisation de la membrane plasmique des cellules chromaffines ont ete developpees: utilisation de detergent non ioniques (la digitonine) ou de toxines bacteriennes. Nous avons observe l'augmentation de la duree d'incubation des cellules, entre la phase de permeabilisation et l'etape de stimulation induite par le calcium libre, entraine une diminution progressive de la secretion, pouvant atteindre 60% apres 20 minutes. Les proteines cytosolubles, qui diffusent du cytoplasme vers le milieu extracellulaire ont ete collectees, puis reintroduites dans des cellules permeabilisees ayant perdu leur capacite de secretion. Il est possible de restaurer totalement la secretion avec des quantites appropriees de proteines cytoplasmiques. La calpactine, presente parmi ces proteines cytoplasmiques, est capable de retablir specifiquement la secretion de facon partielle. Elle necessite la presence d'atp, ce qui suggere qu'une etape de phosphorylation pourrait reguler son activite. La calpactine est incapable de restaurer la secretion pour des cellules deficientes en proteine-kinase c (pk-c) ou pour lesquelles la pk-c a ete inhibee par la sphingosine ou par un traitement prolonge avec les esters du phorbol (regulation depletive). Au contraire, la calpactin-pre-phosphorylee in vitro par la pk-c purifiee est capable de restaurer la secretion dans des cellules deficients en pk-c. La calpactine est fortement impliquee dans la secretion, sa participation dans l'exocytose necessitant phosphorylation par la pk-c


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  • Cote : Th.Strbg.Sc.1991;1117
  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Bibliothèque L'Alinéa - Droit Sciences.
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  • Cote : H 503.000,1991

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  • Cote : 1991STR13176
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  • PEB soumis à condition
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