Recherche Avancée

Thèse soutenue

Contribution à la génétique moléculaire de la levure saccharomyces cerevisiae : isolement et caractérisation du gene erg12 codant pour la mevalonate kinase

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Auteur / Autrice : Ahmad Oulmouden
Direction : Francis Karst
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
Date : Soutenance en 1991
Etablissement(s) : Poitiers

Résumé

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La mevalonate kinase catalyse la premiere etape de phosphorylation de l'acide mevalonique, precurseur biosynthetique des sterols et des isoprenoides. Des mutants de levure saccharomyces cerevisiae (erg12-1, erg12-3 et erg12-2) defectifs dans l'activite mevalonate kinase ont ete isoles. Le gene erg12 a ete isole par complementation de la mutation erg12-1 a partir d'une banque genomique de levure. L'identite du gene erg12, comme gene de structure de la mevalonate kinase, a ete etablie par son expression aussi bien chez la levure que chez e. Coli. La disruption de la partie codante du gene erg12 in situ par l'integration du gene ura3 comme marqueur est lethale pour les cellules haploides de levure, indiquant que ce gene est essentiel pour la viabilite des cellules. La sequence nucleotidique complete du gene erg12 et de ses regions flanquantes a ete determinee; elle porte un seul cadre de lecture ouvert codant pour une proteine de 443 acides amines de mm 48,5 kda. Le gene erg12 a ete localise sur le chromosome 13 a 13 cm du gene rna1. Nous avons pu montrer que le gene erg12 est identique (localisation genetique, sequence nucleotidique) au gene rar1 decrit comme implique dans la stabilite des plasmides a faible regime de replication. Nous avons pu montrer que la mevalonate kinase n'est pas une enzyme limitante dans la voie de biosynthese de l'ergosterol chez la levure. Cependant, cette forte sensibilite au fpp et au gpp indique que cette enzyme pourrait jouer un role cle dans la regulation de cette voie