Isolement et caractérisation du gène de la protéine capsidique du virus de la mosai͏̈que chromée de la vigne GCMV : expression in vitro et dans des plantes transgéniques

Isolation and characteriszation of the coat protein gene of grapevine chrome mosaic virus (GCMV) : expression in vitro and in transgenic plants

• Auteur / Autrice : Véronique Brault
• Direction : Jean Dune
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Bordeaux 2

Résumé

L'arn2 du virus de la mosaique chromee de la vigne (gcmv) a ete clone et sequence. Cet arn, de 4441 nucleotides de long, code potentiellement pour une proteine de 146 kda. Ceci confirme les experiences de traduction in vitro de l'arn2 qui ont montre qu'il etait traduit sous forme d'une polyproteine liberant a partir de son extremite c-terminale la proteine capsidique. Le sequencage chimique de l'extremite n-terminale de la proteine capsidique isolee de virions ainsi que la recherche de sites de clivage reconnus par les proteases virales nous ont conduit a considerer deux sites potentiels de clivage liberant la proteine capsidique (r/a et q/a respectivement en position 810/811 et 855/856). Des constructions pouvant conduire a la synthese d'une proteine ayant l'une ou l'autre des deux extremites determinees precedemment ont ete obtenues. Les polypeptides correspondant au site de clivage r/a ont la meme migration electrophoretique que la proteine capsidique isolee de virions ce qui tend a demontrer que c'est le veritable site de clivage de la capside. Ces genes hybrides ont ete sous-clones dans des vecteurs intermediaires et introduits dans le genome de tabacs qui expriment la proteine capsidique du gcmv